中文摘要：

肝癌细胞的相对辐射抗拒及肝病背景限制放疗剂量的提高，导致放疗疗效不佳。DNA修复是细胞辐射抗拒机理的主要原因之一，DSB修复决定辐射后细胞存活。我们前期研究表明不同p53状态肝癌细胞DNA损伤修复能力不同。本项目在前期基础上进一步探索肝癌细胞中DNA DSB修复机制。采用X线诱导DSB产生，通过"彗星"方法分析DSB水平，结果表明2Gy X线照射后，肝癌细胞尾力矩较未照组明显增加。通过r-H2AX方法检测肝癌细胞DSB修复效率,8Gy X线照射2小时后，对照组磷酸化r-H2AX复制叉为16-18个，SF2为0.54-0.59,而导入野生型PTEN基因的肝癌细胞的复制叉个数为29，SF2下降至0.34，提示实验组DSB修复减弱，细胞存活减少，达到了辐射增敏的目的。利用SiRNA抑制N-RAS、ATM蛋白表达，miRNA抑制DNA-PKcs表达，阻断DSB信号传导、抑制DSB修复，也能达到减少肝癌细胞存活的目的。此外，分析了肝癌组织miRNA表达谱，与肝硬化相比， 表达下调9 个，上调3 个。本研究结果为阐明肝癌细胞辐射敏感性分子机制提供理论依据，也将为研究肝癌辐射增敏提供新的思路。