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采用磁微粒分离酶联免疫法构建基于KGN细胞的雌激素生物合成筛选模型
  • ISSN号:1001-6880
  • 期刊名称:《天然产物研究与开发》
  • 时间:0
  • 分类:R915[医药卫生—微生物与生化药学;医药卫生—药学]
  • 作者机构:[1]中国科学院成都生物研究所,成都610041, [2]中国科学院研究生院,北京100049, [3]乌兹别克斯坦科学院生物化学研究所,塔什干10012,乌兹别克斯坦
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金项目(20932007,30900769);中国科学院”西部之光”项目;国家”重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09307-002-02)
中文摘要:

雌激素在机体生长发育中发挥着重要作用,其合成代谢紊乱会导致乳腺癌和骨质疏松等疾病发生。目前,基于细胞的雌激素合成筛选模型需用到放射性底物,对环境污染大,成本较高,限制了具有组织特异性调控雌激素合成的药物筛选。我们以高表达芳香化酶的KGN细胞为检测对象,比较基于聚苯乙烯酶联免疫法和磁微粒分离酶联免疫法的雌二醇ELISA试剂盒的交叉反应和灵敏度,发现相对于聚苯乙烯酶联免疫法,磁微粒分离酶联免疫法能够稳定高效的检测雌激素合成。进一步比较培养基中酚红和底物睾酮对雌二醇检测的影响,成功建立通过磁微粒酶联免疫法检测KGN细胞雌二醇合成的筛选模型。

英文摘要:

Estrogens play important roles in the growth and development of human, and the disorders of estrogen biosyn- thesis and metabolism can lead to occurrence of many diseases such as breast cancer and osteoporosis. Currently, the cell-based screen models for estrogen biosynthesis need the use of radioactive substances, which cause environmental pollution and the cost for screening too high tO be affordable,thus severely restrict the finding of new drugs to modulate estrogen biosynthesis in a tissue-specific manner. By using human granulosa-like KGN cells which express high amount of aromatase, we found that the 17β-estradiol magnetic particle-based enzyme-linked imminosorbent assay (ELISA) was more stable and sensitive than conventional polystyrene-based ELISA in quantification of 17β-estradiol by comparing the cross-reactivity and sensitivity of the two different 17β-estradiol ELISA methods. After further examining the effects of phenol red in cell culture medium and testosterone substance concentration on the quantitative detection of 17β-estradiol ,we successfully established a human granulosa-like KGN cell-based screen platform for estrogen biosynthesis by using magnetic particle-based ELISA.

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期刊信息
  • 《天然产物研究与开发》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院成都文献情报中心
  • 主编:方曙(执行)
  • 地址:成都市一环路南二段16号
  • 邮编:610041
  • 邮箱:trcw@clas.ac.cn
  • 电话:028-85210304
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-6880
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1335/Q
  • 邮发代号:62-107
  • 获奖情况:
  • 1996年被评为四川省首界优秀期刊,2000年被评为四川省第二界优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:29369