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籽粒苋AhNAD-ME的序列特征与表达
  • ISSN号:0496-3490
  • 期刊名称:《作物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q550.4[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]山西省农业科学院作物科学研究所,山西太原030032, [2]山西大学生物工程学院,山西太原030006, [3]农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室,山西太原030006
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30971838); 山西省科技攻关项目(201303110015-1); 山西省归国留学人员科研项目(2013-146)资助
中文摘要:

NAD(P)-苹果酸酶催化苹果酸氧化脱羧,产生丙酮酸和CO2,伴随NAD(P)的还原。在C4植物中,苹果酸酶参与了C4光合作用。本研究对克隆的双子叶C4植物籽粒苋NAD-苹果酸酶基因(AhNAD-ME)编码的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明,AhNAD-ME具有苹果酸酶的完整功能域,包括苹果酸N端结构域和苹果酸酶的NAD结合结构域;进化树表明,该序列属于NAD-ME的α亚基,该亚基定位于线粒体基质中。半定量RT-PCR分析表明,该基因主要在叶片和茎中表达,表达量随光照时间延长而增加。将AhNAD-ME基因重组到原核表达载体pEASY-E1中,电击法转化到大肠杆菌Transette(DE3)菌株中,IPTG诱导其高效表达,表达的融合蛋白的分子量与预期相符,主要以包涵体形式存在。

英文摘要:

The NAD(P)-malic enzyme (NAD(P)-ME) found in many metabolic pathways catalyzes the oxidative decarboxylation of L-malate, which results in producing pyruvate, CO2 and NAD(P)H. In C4 plants, NAD(P)-ME plays a key role in photosyn-thetic carbon fixation. This study was aimed to characterize the AhNAD-ME in dicotyledonous C4 Amaranthus hypochondriacus by sequence analysis, examine the expression patterns of AhNAD-ME gene in different tissues and different durations of illumina-tion time, and construct a recombinant plasmid pEASY-E1 harboring the AhNAD-ME cDNA and then transform the plasmid into E. coli Transette (DE3) for prokaryotic expression after IPTG induction. The result showed that AhNAD-ME contains all of the motifs required for a complete and functional malic enzyme and is localized specifically to the mitochondrial matrix. Semi-quantitative RT-PCR results showed that AhNAD-ME was constitutively expressed in all examined tissues, with different expression levels, and strongly up-regulated under light in the leaf and stem. Results of SDS-PAGE demonstrated that the specific fusion protein with an expected molecular weight was successfully expressed in E. coli transette (DE3) induced by IPTG.

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期刊信息
  • 《作物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国作物学会 中国农业科学院作物科学研究所
  • 主编:万建民
  • 地址:北京海淀区中关村南大街12号中国农业科学院
  • 邮编:100081
  • 邮箱:zwxb301@caas.cn
  • 电话:010-82108548
  • 国际标准刊号:ISSN:0496-3490
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1809/S
  • 邮发代号:82-336
  • 获奖情况:
  • 2002年-第三届中国科协优秀科技期刊二等奖,2002-2009年-百种中国杰出学术期刊,2004年获“全国优秀期刊一等奖”,2005年获第三届国家期刊奖提名奖,2009年评为“2008年度中国精品科技期刊”,2009年被评为“新中国60年有影响力的期刊”,2011年获"第二届中国出版政府奖期刊奖提名奖"
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:49369