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重组刚地弓形虫Peroxiredoxin蛋白的纯化及抗血清制备
  • ISSN号:1673-5234
  • 期刊名称:中国病原生物学杂志
  • 时间:2011.3.3
  • 页码:201-203
  • 分类:R382.5[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]山西医科大学寄生虫学教研室,山西太原030001, [2]徐州医学院病原生物与免疫学教研室,江苏徐州221004
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.81071374); 徐州医学院科研课题(No.2010KJ16)
  • 相关项目:基于蛋白质组学分析的弓形虫速殖子新的保护性抗原研究
中文摘要:

目的对原核系统表达的重组刚地弓形虫Peroxiredoxin(rTgPrx)蛋白进行镍亲和层析纯化,免疫大鼠,制备抗血清。方法优化rTgPrx表达条件,获得大量的可溶性蛋白,经镍亲和层析法纯化后皮下注射免疫Wistar大鼠,间接ELISA法测定血清抗体效价。结果在表达菌液A600为0.5,IPTG浓度为0.2 mmol/L,37℃诱导10 h时,可溶性rTgPrx表达量较高;用镍亲和层析纯化获得纯的目的蛋白,免疫大鼠后诱导产生高滴度抗体血清,效价达1∶12 800以上。结论镍亲和层析法纯化的rTgPrx具有免疫原性,用该蛋白免疫大鼠可获得高效价的抗rTgPrx血清。

英文摘要:

Objective To purify recombinant peroxiredoxin of Toxoplasma gondii expressed in prokaryotic cells with Ni-NTA affinity chromatography and immune rats and prepare antisera.Methods Conditions for expression of rTgPrx were optimized.Large quantities of soluble rTgPrx were purified with Ni-NTA affinity chromatography.Rats were immunized with purified rTgPrx through subcutaneous injection.The antibody was detected by indirect ELISA.Results Soluble rTgPrx was induced by 0.2 mmol/L IPTG administered for 10 h at 37 ℃;with an A600 of 0.5,relatively large quantities of soluble rTgPrx were expressed.Rats immunized with the purified rTgPrx exhibited a high titer antibody.The titer of prepared antisera was 1∶12 800.Conclusion rTgPrx that was purified with Ni-NTA affinity chromatography was found to be immunogenic.High-titer antisera were obtained by immunizing rats with the purified rTgPrx.

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期刊信息
  • 《中国病原生物学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 卫生部疾病控制司 山东省寄生虫病防治研究所
  • 主编:庄辉
  • 地址:山东省济宁市太白楼中路11号
  • 邮编:272033
  • 邮箱:www.cjpb.org
  • 电话:0537-2342934
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-5234
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5457/R
  • 邮发代号:24-81
  • 获奖情况:
  • 中华预防医学会、系列杂志优秀期刊,山东省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8395