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抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选
  • ISSN号:1671-7236
  • 期刊名称:《中国畜牧兽医》
  • 时间:0
  • 分类:R392[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学动物医学院,北京100193
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2008AA10Z423); 国家自然科学基金重点项目(30830082)
中文摘要:

本研究使用噬菌体抗体库技术筛选针对庆大霉素(gentamicin)的单链抗体。以抗庆大霉素杂交瘤细胞株(2A3)为基因来源构建scFv基因,连接至pCANTAB5E噬菌粒载体,通过电击转化TG1(Escherichia coli TG1)构建了库容量为6.5×10^6噬菌体单链抗体库。抗庆大霉素噬菌体单链抗体库进行三轮富集筛选,通过Phage-ELISA技术成功筛选出了9个抗庆大霉素噬菌体阳性克隆,为开发新型残留检测用抗体奠定了基础。

英文摘要:

In this study,we constructed a phage display antibody library specific for gentamicin(GEN) to get the anti-getamicin single chain antibody(scFv).We used the anti-gentamicin hybridoma(2A3) as a source of gene to produce full-length scFv fragment.The full-length scFv fragment was ligated into the phagemid vector pCANTAB5E.Then the phagemid was transformed to E.coli TGl cells by electroporation.The size of antibody libraries was 6.5×106.The primary phage display library was riched by stabilized antigen immunoaffinity panning with GEN-OVA conjugates.9 clones congtained insert and showed GEN-positive in phage-ELISA,which lay the foundation for further immunological analysis.

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期刊信息
  • 《中国畜牧兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 主编:李琍
  • 地址:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:zgxmsy@caas.cn
  • 电话:010-62816020 62811226 62810371
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7236
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4843/S
  • 邮发代号:2-215
  • 获奖情况:
  • 1996年被农业部评为“95中国出版成就展”参展期刊...,1998年在首届全国畜牧兽医优秀科技期刊评比中总分...,2002年被中国期刊协会农业期刊分会和中国农学会评...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:22619