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猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用
  • ISSN号:1001-411X
  • 期刊名称:《华南农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S855.3[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:华南农业大学兽医学院,广东广州510642
  • 相关基金:国家自然科学基金(U1405216;31172321和31472200); 广东省高等教育科技创新特殊项目(2012CXZD0013)
中文摘要:

【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RTLAMP-LFD检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。

英文摘要:

【Objective】The experiment was conducted to establish a rapid real time detection method of classical swine fever virus at local fields. 【Method】A rapid detection method( RT-LAMP-LFD) of classical swine fever virus( CSFV) was developed by loop-mediated isothermal amplification( LAMP) combined with lateral flow dipstick( LFD) method. The LAMP method for amplification of the CSFV NS5 B gene using fluorescein isothiocyanate-labeled primer was combined with a chromatographic LFD for rapid and simple visual detection of CSFV. 【Result】This method could specifically detect CSFV,but not other virus such as PRRSV,JEV and PCV-2. The minimum detection limit of the CSFV-RT-LAMP-LFD method was 50 pg. The detection could be finished within 1 h without using complex instruments such as PCR machine and the results were visible by eye. 【Conclusion】This RT-LAMP-LFD method is a highly specific and sensitive,safe,rapid and simple way for field detection of CSFV infection.

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期刊信息
  • 《华南农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:华南农业大学
  • 主办单位:华南农业大学
  • 主编:陈晓阳
  • 地址:广州天河区五山路483号
  • 邮编:510642
  • 邮箱:journal@scau.edu.cn
  • 电话:020-85280069 38746672
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-411X
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1110/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 广东省第三届优秀科学技术期刊奖(2000),全国高校优秀科技期刊一等奖(2004),第三届国家期刊奖百种重点期刊(2004),中国高校精品科技期刊(2006)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16179