中文摘要：

目的观察不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyrorrtonaz gingivalis，Pg）对人牙龈成纤维细胞基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）表达水平的影响，探讨fimA基因型与如致病力之间的关系。方法PgATCC33277（I型）、WCSP115（Ⅱ型）、WCSP1．5（Ⅲ型）、W83（Ⅳ型）分别与牙龈成纤维细胞在标准条件下共同孵育（对照组为达尔伯克氏改良伊格尔培养基），于孵育后1、3、6和12h收集细胞和培养上清液，应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）和ELISA法分别检测牙龈成纤维细胞MMP-1、MMP-2的mRNA及蛋白的动态表达。结果与对照组相比，聘刺激下牙龈成纤维细胞MMP-1、MMP-2的mRNA和蛋白水平表达量均明显上调（P〈0．01）；其中Ⅱ型fimA型Pg的刺激作用强于其他各型，不同时间点MMP-1mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为（28．88±3．12）-（231．01±24．99）、（1．35±0．17）-（3．084-1．20）；MMP-2mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为（20．42±2．21）～（188．34±37．37）、（2．57±0．76）～（18．08±1．15），与其他各型相比差异有统计学意义（P〈0．05）；III型Pg的刺激作用较弱，不同时间点MMP-1mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为[（5．11-4-0．55）～（72．84±8．84）]μg／L、[（0．68±0．13）～（1．464-0．94）]μg／L；MMP-2mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为[（4．554-0．55）～（25．75±3．12）]μg/L、[（2．284-0．93）～（11．22±2．46）]μg/L，与其他各型相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Pg可以诱导牙龈成纤维细胞过表达MMP，fimA基因型与堍的毒力作用相关，fimA型可能为魄致病力差异的基因基础。

英文摘要：

Objective To investigate the mechanism of matrix metalloproteinases （MMP） regulations of human gingival fibroblasts （HGF） by challenge of Porphyromonas gingivalis （Pg） with different fimA genotypes. Methods Pg ATCC 33277 （ type Ⅰ ）, WCSP115 （ type Ⅱ ）, WCSP1.5 （ type Ⅲ）, w83 （type Ⅳ ） were assessed for their inductions of MMP-1 and MMP-2 expression in HGK MMP mRNA levels of HGF were determined by real-time RT-PCR and MMP protein levels in culture supernatant were determined by ELISA at different time intervals （1, 3, 6 and 12 h） following continous co-culture of bacteria with HGF. Results When co-cultured with Pg, the MMP-1 and MMP-2 mRNA and protein expression of HGF significantly increased compared with the negative control group （P 〈 0. 01 ）. The group of type Ⅱ showed greater up-regulated than other lima genotypes in the mRNA and protein expressions of MMP-1 and MMP-2, MMP-1 mRNA [ （28. 88 ±3. 12）-（231.01 ± 24. 99） ] and protein [ （ 1.35 -±0. 17）- （3.08 ± 1.20）] μg/L; MMP-2 mRNA [（20.42 4, 2. 21）-（188.34 ± 37. 37）] and protein [ （2. 57 ±0. 76） -（ 18.08 _± 1.15） ] μg/L for different time periods; While the group of type HI was weaker than other fimA genotypes, the level of MMP-1 mRNA was [ （5. 11 ±0. 55）-（72. 84 ±8.84） ] and protein [ （0. 68 ± 0. 13） -（ 1.46 ± 0. 94 ） ] μg/L, MMP-2 mRNA [ （4. 55 ± 0.55 ） -（ 25. 75 ± 3.12 ） ] and protein [ （2. 28 ± 0. 93 ） - （ 11.22 ± 2.46） ]μg/L （ P 〈 0. 05 ）. Conclusions Pg could induce HGF to over-express MMP, and fimA genotypes of Pg may be related to this pathogenicity, which might indicate fimA genotype is associated with pathogenesis of Pg.