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MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达
  • ISSN号:0258-879X
  • 期刊名称:《第二军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q782[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]第二军医大学基础部细胞生物学教研室,上海200433, [2]宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室,银川750004
  • 相关基金:国家自然科学基金(30600326),宁夏自然科学基金(NZ0775),宁夏医学院特殊人才启动基金.
中文摘要:

目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosareoma oncogene homologueA)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MarA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitorcells,LEPCs)。方法:通过PCR方法克隆MarA基因全长,将其构建到pBMN—Z-IRES-Neo逆转录病毒载体中获得pBMN—MafA—Neo载体;将该载体导入Phoenix包装细胞系,收集病毒上清并感染LEPCs,筛选稳定表达MafA的LEPCs;RT-PCR方法检测MafA表达对LEPCs分子表型的影响。结果:成功构建pBMN-MarA-Neo载体,并获得稳定表达MafA基因的肝原始细胞系(LEPCs-MafA)。LEPCs-MafA细胞GK和GLUT2基因表达高于LEPCs。结论:成功获得稳定表达MarA的肝原始细胞系,为研究MafA诱导肝干细胞向胰腺细胞转分化奠定了基础。

英文摘要:

Objective: To construct a recombinant retroviral vector harboring MafA and to establish a liver epithelial progenitor cell (LEPC) line for stable expression of MafA. Methods: MafA was amplified by PCR and suncloned into pBMN-ZIRES-Neo vector to obtain pBMH-MafA-Neo vector. After introducing the pBMN-MafA-Neo into Phoenix package cells,the cell culture supernatant was used to infect LEPCs. LEPCs stably expressing MafA gene were screened out. RT-PCR was used to detect the influence of MafA on the phenotype of LEPCs. Results: We successfully constructed pBMH-MafA-Neo vector and obtained LEPCs which stably expressed MafA. Expression of GK and GLUT2 genes in LEPCs-MafA cells was higher than that in the LEPCs. Conclusion: We have successfully obtained LEPCs which can stably express MafA,laying a basis for studying the differentiation of LEPCs into pancreas cells.

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期刊信息
  • 《第二军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第二军医大学
  • 主办单位:第二军医大学
  • 主编:吴孟超
  • 地址:上海市翔殷路800号
  • 邮编:200433
  • 邮箱:bxue@smmu.edu.cn
  • 电话:021-81870791
  • 国际标准刊号:ISSN:0258-879X
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1001/R
  • 邮发代号:4-373
  • 获奖情况:
  • 2008年被评为首批"中国精品科技期刊"2008年获第二...,2004年获第四届全军医学期刊质量评比优秀奖,2002年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖,2000年获首届《CAJ-CD规范》执行评优活动执行优秀奖,1999年获上海高校优秀自然科学学报评比一等奖,1999年获全国高校自然科学学报及教育部优秀科技期...,1997年获上海科技期刊评比二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:30859