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河南华溪蟹金属硫蛋白分泌型表达载体的构建、表达及纯化
  • ISSN号：1002-6630
  • 期刊名称：《食品科学》
  • 时间：0
  • 分类：Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构：[1]山西大学生命科学学院
  • 相关基金：国家自然科学基金面上项目(30970361);高等学校博士学科点专项科研基金项目(20111401110010);山西省自然科学基金项目(2010011043-2)
作者： 刘进平[1], 何永吉[1], 王兰[1]
关键词： 河南华溪蟹, 金属硫蛋白, 表达
中文摘要：

目的:构建河南华溪蟹金属硫蛋白(metallothionein,MT)分泌型表达载体并诱导其可溶表达。方法:采用基因重组技术,将河南华溪蟹MT基因亚克隆至碱性磷酸盐启动子(alkaline phosphatase promoter,phoA)分泌型原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过低磷酸盐诱导重组蛋白表达,经Ni2+螯合柱分离纯化后,利用紫外光谱扫描分析、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)及Western blotting检测鉴定重组MT。结果:phoA-MT分泌型表达载体构建成功,工程菌经低磷酸盐诱导后重组MT以可溶形式获得表达,紫外光谱扫描和Western blotting证实表达产物的正确性,SDS-PAGE分析其纯度较高,主要以单体和二聚体的形式存在,其分子质量分别约为7.5、15 kD。结论:成功实现了河南华溪蟹MT的重组表达。

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期刊信息
  • 《食品科学》
  • 北大核心期刊（2011版）
  • 主管单位:中国商业联合会
  • 主办单位:北京市食品研究所
  • 主编：孙勇
  • 地址：北京西城区禄长街头条4号
  • 邮编：100050
  • 邮箱：foodsci@126.com
  • 电话：010-83155446-8006
  • 国际标准刊号：ISSN：1002-6630
  • 国内统一刊号：ISSN：11-2206/TS
  • 邮发代号:2-439
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,1986年原商业部重大成果三等奖,1997年国内贸易部优秀科技期刊三等奖,第三届中国出版政府奖提名奖,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘（网络版）,美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2004版）,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）,英国英国皇家化学学会文摘,英国食品科技文摘,中国北大核心期刊（2000版）
  • 被引量:115579