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DNA去甲基化对急性B淋巴细胞白血病细胞株中DNA甲基转移酶基因及微RNA作用的研究
  • ISSN号:1009-9921
  • 期刊名称:《白血病.淋巴瘤》
  • 时间:0
  • 分类:R733.71[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]山西省心血管病医院实验室,太原030024, [2]太原市中心医院中心实验室,030009, [3]山西省肿瘤医院消化微创外科,太原030013, [4]山西医科大学研究生院,太原030001
  • 相关基金:山西省基础研究计划(2012011038-3);山西省卫生厅科技攻关计划(2011085)
中文摘要:

目的:探索甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞株NALM-6的作用以及对细胞中微RNA(miRNA)表达水平的影响。方法用不同浓度5-Aza-CdR处理NALM-6细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,采用荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测5-Aza-CdR处理后细胞DNA甲基转移酶(DNMT)基因mRNA表达水平的变化,采用miScript miRNA PCR Array芯片检测去甲基化后细胞中表达量发生改变的miRNA。结果 NALM-6细胞经不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间后,细胞生长受抑,最高抑制率达(74.163±0.381)%。5-Aza-CdR作用浓度与DNMT基因mRNA表达水平呈反比,浓度为1000μmol/L的5-Aza-CdR作用细胞72 h后,DNMT-1的相对表达量降至0.453±0.021,DNMT-3L的相对表达量为0.003±0.001, DNMT-3B的相对表达量为0.395±0.019。miScript miRNA PCR Array筛选出3个miRNA(miR-184、miR-23a-3p、miR-34a-5p)与DNA甲基化相关。结论5-Aza-CdR可下调NALM-6细胞中DNMT基因的表达,并对细胞增殖有抑制作用。miR-184、miR-23a-3p和miR-34a-5p在B-ALL的发生、发展中与DNA甲基化相关。

英文摘要:

Objective To explore the function of 5-Aza-CdR in B-cell acute lymphocytic leukemia cell line NALM-6 and its influence on the expression of microRNA (miRNA) in the cells. Methods NALM-6 was treated with different concentrations of 5-Aza-CdR. Cell proliferation was detected by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) test, and DNA methyltransferase (DNMT) mRNA expression level was detected by reverse transcription PCR (RT-PCR). The expression changes of miRNA were detected by miScript miRNA PCR Array chip in cells after methylation. Results NALM-6 cell growth was inhibited by different concentrations of 5-Aza-CdR processing time, reaching to the maximum inhibitory rate was (74.163 ±0.381) %. 5-Aza-CdR affected concentrations was inversely proportional with expression level of DNMT mRNA. After 1 000 μmol/L of 5-Aza-CdR was dealed with cell 72 h, the relative expression of DNMT-1 was reduced to 0.453 ±0.021, DNMT-3L was 0.003±0.001, DNMT-3B was 0.395±0.019. MiScript miRNA PCR array sieved out 3 miRNA (miR-184, miR-23a-3p, miR-34a-5p) associated with DNA methylation. Conclusions 5-Aza-CdR down regulates the expression of DNMT gene in NALM-6 cells, and inhibits the proliferation of cells. MiR-184, miR-23a-3p and miR-34a-5p are related to DNA methylation in the occurrence and development of B-cell acute lymphocytic leukemia.

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期刊信息
  • 《白血病.淋巴瘤》
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会 山西省肿瘤研究所 山西省肿瘤医院
  • 主编:
  • 地址:太原市职工新街3号
  • 邮编:030013
  • 邮箱:bxblbl@sina.com
  • 电话:0351-4650389
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-9921
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5356/R
  • 邮发代号:22-107
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国剑桥科学文摘
  • 被引量:4369