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电转化法制备高转化效率的E.coli感受态细胞研究
  • ISSN号:1673-1689
  • 期刊名称:《食品与生物技术学报》
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南昌大学食品科学教育部重点实验室,江西南昌330047, [2]南昌大学中德联合研究院,江西南昌330047, [3]江西省劳动卫生职业病防治研究所,江西南昌330006
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30360081)
中文摘要:

为了制备高转化效率的E.coliTG1和E.coliDH5a感受态细胞,采用电转化方法探索E.coli生长对数期的不同生长阶段、质粒DNA含量、电场强度对E.coli转化效率的影响。研究结果表明:40μL菌液中加1.0ngpUC19DNA,用间隙0.2cm电击杯时转化效率最高,E.coli TG1有1个电转化效率峰值,即A600为0.665时,转化效率达1.7×10^9cfu/μg pUC19DNA;E.coliDH5a有2个转化效率峰值,即A600为0.443和0.810时,转化效率均为3.0×10^9 cfu/μg pUCl9DNA。研究结果表明,在相同情况下E.coliDH5a的转化效率高于E.coli TG1,利用本实验确定的参数可制备出高转化效率的电转化感受态细胞。

英文摘要:

To establish a high efficiency of electrotransformation , two different strains of E. coli DH5a and E. coli TG1 were used to investigate the influence of growth period during log phase, the content of the plasmid PUC19 DNA and the electric field strength on electrotransformation efficiencies. A highest electrotransformation efficiency was achieved at when 1.0 ng of plasmid DNA was used with 40μl solution and packed in 0.2 cm cuvette. A peak of electrotransformation efficiency for E. coli TG1 was 1. 7× 10^9 transformants per μg PUC19 DNA when the optical density (A600) was 0. 665 . Two peaks of electrotransformation efficiencies for E. coli DH5α were the same as 3.0×10^9 transformants per/tg PUC19 DNA when the optical density (A600) were 0. 443 and 0. 810. The results suggested that the transformation efficiency of E. coli DH5α was higher than E. coli TG1 with the identical condition and the parameters of the this experiment can be further applied to prepare the high efficient competent cell.

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期刊信息
  • 《食品与生物技术学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:江南大学
  • 主编:金征宇
  • 地址:江苏无锡蠡湖大道1800号江南大学蠡湖校区
  • 邮编:214122
  • 邮箱:zzs@jiangnan.edu.cn spyswjs@163.com
  • 电话:0510-85913526
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-1689
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1751/TS
  • 邮发代号:28-79
  • 获奖情况:
  • 全国轻工类中文核心期刊,全国食品工业类中文核心期刊,江苏省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘
  • 被引量:9171