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谷氨酸在分离的小鼠皮层突触连接体的释放
  • ISSN号:0529-1356
  • 期刊名称:解剖学报
  • 时间:2014
  • 页码:861-864
  • 分类:R338.6[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]山西医科大学附属人民医院中心实验室,太原030012
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81201061);山西省青年科技研究基金资助项目(2013021036-2);山西省回国留学人员科研资助项目(2013-124)
  • 相关项目:阻断IL-6信号对孤独症BTBR小鼠行为学的改善及其机理研究
中文摘要:

目的分析兴奋性神经递质谷氨酸在体外分离的小鼠皮层突触连接体的释放。方法解剖分离小鼠的大脑皮层,组织经匀浆后使用3层147μm的尼龙网筛进行过滤,离心后重悬沉淀为突触连接体。谷氨酸释放检测实验根据谷氨酸脱氢酶酶促反应原理进行,利用多功能读数仪读取产物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的荧光值。采用谷氨酸标准品绘制标准曲线,使用制备的突触连接体进行谷氨酸释放检测,进行3次独立重复实验。结果谷氨酸标准品浓度与荧光值具有良好的线性关系。新鲜制备的突触连接体在加入去极化剂KCl后,释放谷氨酸显著增加并逐渐达到平台期,加入Triton X-100裂解突触连接体后释放谷氨酸明显增加。冻融1次的突触连接体失去活性,与新鲜制备的突触连接体的谷氨酸释放曲线不同。结论对小鼠皮层突触连接体的提取方法进行了改良,检测和分析了兴奋性神经递质谷氨酸在分离制备的小鼠皮层突触连接体的释放。

英文摘要:

Objective To detect the release of glutamate from the isolated synaptoneurosomes from the mouse cortex. Methods The mouse cortex was dissected, homogenized and filtered through three layers of 147 μm nylon meshes. The synaptoneurosomes were resuspended after centrifuged. An enzyme-linked fluorescence detection method was used to detect the glutamate release, which utilized glutamate dehydrogenase, and the reduction of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADP) to NADPH. The glutamate standard curve was set up and then the glutamate release from isolated synaptoneurosomes was tested and analyzed in three independent experiments. Results A good linear relationship was found between the glutamate concentrations and fluorescence values. The release of glutamate from synaptoneurosomes significantly increased after depolarization agent KC1 added and gradually reached a plateau. Glutamate release was increased more when Triton X-100 was added. The inactive synaptoneurosomes after one freeze-thaw cycle had a different curve of glutamate release. Conclusion The release of excitatory neurotransmitter glutamate from synaptoneurosomes of the mouse cortex isolated using the improved method is well studied.

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期刊信息
  • 《解剖学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国解剖学会
  • 主编:章静波
  • 地址:北京海淀区学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100191
  • 邮箱:jpxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82802969
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-1356
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2228/R
  • 邮发代号:2-249
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科协优秀学术期刊三等奖,1997年第二届全国优秀科技期刊二等奖,97、98、99连续三年科技基础性和高科技期刊资助三等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9672