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牛巴贝斯虫棒状体相关蛋白1C端的克隆与表达
  • ISSN号:1673-4696
  • 期刊名称:《中国兽医科学》
  • 时间:0
  • 分类:S852.723[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31272556);农业部肉牛牦牛产业体系项目(CARS38)
中文摘要:

用生物信息学方法,对牛巴贝斯虫棒状体相关蛋白(rhoptry-associated protein-1,RAP-1)的编码基因进行分析,并与其他巴贝斯虫和泰勒虫对应序列进行比对,以筛选出抗原性、特异性良好的RAP-1基因C端区域,设计特异引物,对基因进行克隆和原核表达,并应用Western-blot对重组蛋白的反应原性与特异性进行了分析。结果表明,目的蛋白的分子质量为51ku,可溶性表达量为1.51mg/mL,只与牛巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应,而与其他巴贝斯虫、泰勒虫和无浆体阳性血清无交叉反应,预期可作为ELISA诊断方法的候选抗原,为牛巴贝斯虫病诊断方法的建立奠定了基础。

英文摘要:

A C-terminal fragment with high antigenicity and specificity was screened from rhoptryassociated protein (RAP-l) of Babes& boris using bioinformatics analysis and sequence alignment with those of other Babesia and Theileria. The 3'-terminal fragment of the RAP-1 gene was cloned and expressed in prokaryotic express system. The reactogenicity and specificity of the recombinant protein were evaluated by Western-blot. The results showed that the fusion protein had 51 ku and expression output as soluble protein was 1.51 mg/mL. Based on Western-blot analysis,the recombinant protein had strong reaction with the positive sera from B. boris infected cattle but no cross-reaction with positive sera against other Babesia,Theileria and Anaplasma species. It suggests the recombinant protein RAP-1 will be used as a candidate of diagnostic antigen to develop an ELISA technique. This study will be informative for developing serodiagnostic methods for B. boris infection in the future.

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编:殷宏
  • 地址:兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编:730046
  • 邮箱:zgsykx@zgsykx.com
  • 电话:0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4696
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6141