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蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因(RcGPDH)的克隆及功能分析
  • ISSN号:1007-9084
  • 期刊名称:中国油料作物学报
  • 时间:0
  • 页码:451-458
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学] S565.61[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]江西农业大学园林与艺术学院,江西南昌330045, [2]中国科学院西双版纳热带植物园,云南昆明650223, [3]江西省景德镇高等专科学校,江西景德镇333000
  • 相关基金:国家自然科学基金(30900908); 云南省自然科学基金项目(2008CD166); 中国科学院“西部之光”项目
  • 相关项目:蓖麻PDAT基因在羟基化蓖麻油累积过程中的功能分析
中文摘要:

为了阐明蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因(glycerol-3-phosphate dehydrogenase,RcGPDH)在蓖麻油累积过程中的作用,本研究根据已报道的蓖麻种子表达序列标签(Expressed Sequence Tags,EST)设计引物,通过RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法克隆蓖麻RcGPDH基因的全长并对其序列进行分析,构建了该基因的酵母表达载体pYES2.1/V5-His-TOPO-RcGPDH,以载体pYES2.1/V5-His/lacZ质粒DNA为对照,转化酵母野生型菌株BY4742,运用分光光度法测定转基因酵母的生长曲线,通过香草醛法测定稳定生长期的转基因酵母的油脂含量。结果表明,转基因菌株比转空载体对照菌株生长慢,两者均在培养18h后进入平台期;两个菌株的油脂含量没有明显的差别,表明RcGPDH基因对酵母油脂的累积没有起到积极的作用,在蓖麻种子中可能还存在另一个GPDH同源基因参与三脂酰甘油(TAG)的合成。

英文摘要:

In order to elucidate the role of glycerol-3-phosphate dehydrogenase gene(RcGPDH) from castor bean in castor oil accumulation,we designed primers according to express sequence tags(EST) and cloned the full cDNA of RcGPDH gene by RACE(rapid-amplification of cDNA ends).The yeast expression vector pYES2.1 /V5-His-TOPO-RcGPDH was constructed and transformed to wild yeast strain BY4742,using plasmid pYES2.1/V5-His/lacZ as control.We drew the growth curves of transformed yeast strains with spectrophotometer at 600nm,and determined their oil content using vanillin method.Results showed that they grew stably after cultured 18h,but the strain with RcGPDH gene grew slower than control.The oil content didn't change between the two yeast strains,which suggested that RcGPDH gene was not involved in yeast oil accumulation.These results suggested that other GPDH homologous genes may be involved in triacylglycerls(TAG) synthesis in castor seeds.

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期刊信息
  • 《中国油料作物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农科院油料作物研究所
  • 主办单位:中国农业科学院油料作物研究所
  • 主编:廖伯寿
  • 地址:湖北省武汉市武昌徐东二路2号油料所内
  • 邮编:430062
  • 邮箱:ylxb@oilcrops.cn
  • 电话:027-86813823
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-9084
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1429/S
  • 邮发代号:38-13
  • 获奖情况:
  • 分别于2008年、2011年和2014年连续三届被评为中国...,是北京大学2004-2014年《中文核心期刊要目总览》...,2016年版《中国科技期刊引证报告(核心版)》公布...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11301