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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白与糖蛋白的表达纯化及鉴定
  • ISSN号:1671-7236
  • 期刊名称:《中国畜牧兽医》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118
  • 相关基金:吉林省世行贷款农产品质量安全项目(2011Y28);科技部农业科技成果转化资金(2012GB28100106);吉林农业大学启动基金(201221);吉林省科技发展计划项目(20100230);吉林省科技发展计划项目(20110230).
中文摘要:

为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)核衣壳蛋白(N)和糖蛋白(E),试验通过RT—PCR反应获得ORF7和ORF5基因片段,分别克隆至原核表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS—PAGE分析目的蛋白表达情况,Westernblotting检测表达蛋白的免疫活性,采用亲和层析对表达蛋白进行纯化。结果表明,成功表达N和E融合蛋白,Westernblotting结果表明表达蛋白具有良好的反应原性,纯化蛋白的纯度分别为89%和90%。融化蛋白的表达为PRRSV的分子生物学功能研究和测定抗体检测方法的建立奠定了基础。

英文摘要:

In order to gain nucleocapsid protein (N) and glycoprotein (E) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), the total RNA was extracted,ORF7 and ORF5 genes were obtained by RT PCR, inserted into pET 28a( + ) vector, and then transformed into Escherichia coli BL21(DE3), respectively. The expressed products were identified by SDS PAGE and Western blotting, and purified by affinity chromatography. The results showed that N and E fusion protein were successfully expressed and the proteins had good reactionogenicities by Western blotting analysis. The purities of the purified proteins were 89 % and 90%, respectively. This study could lay foundations for molecular biological function research and es- tablishment of test methods for detection antibodies of PRRSV.

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期刊信息
  • 《中国畜牧兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 主编:李琍
  • 地址:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:zgxmsy@caas.cn
  • 电话:010-62816020 62811226 62810371
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7236
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4843/S
  • 邮发代号:2-215
  • 获奖情况:
  • 1996年被农业部评为“95中国出版成就展”参展期刊...,1998年在首届全国畜牧兽医优秀科技期刊评比中总分...,2002年被中国期刊协会农业期刊分会和中国农学会评...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:22619