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液-质联用法对生物样本中鞘氨醇1-磷酸的微量测定
  • ISSN号:1007-3949
  • 期刊名称:中国动脉硬化杂志
  • 时间:2013.6.6
  • 页码:354-358
  • 分类:R313[医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]山东省高校动脉粥样硬化重点实验室脂质分析实验室 山医学院动脉粥样硬化研究所, [2]山东省高校动脉粥样硬化重点实验室基因功能实验室 山医学院动脉粥样硬化研究所, [3]山东省泰山医学院附属医院,山东省泰安市271000
  • 相关基金:国家自然科学基金(30971098;81070247);山东省泰山学者岗专项基金(ZD056,ZD057);2012年泰山医学院高层次课题培养计划项目(330033)
  • 相关项目:磷脂转运蛋白通过磷酸鞘氨醇1影响高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化功能的分子机制
中文摘要:

目的本文旨在建立一种简便的鞘氨醇1-磷酸分离提取方法,并结合液-质联用法快速检测生物样本中纳克水平的鞘氨醇1-磷酸。方法采用甲醇沉淀结合超声萃取的方法分离鞘氨醇1-磷酸,高速离心去除大颗粒后的上清液采用液-质联用仪在选择性离子监测模式下进行定量分析。结果该分离提取鞘氨醇1-磷酸的方法简便快捷,鞘氨醇1-磷酸在选择性离子监测模式下的定量限为159.7Pg,其在人血浆中的含量为128.8±33.3μg/L;在C57BL/6小鼠血浆、心、肝、肺、肾和脑中的含量分别为181.8±21.1μg/L、37.6±2.8ng/g、54.9±4.9ng/g、230.1±60.5ng/g、21.5±6.7ng/g、102.2±23.8ng/g。结论甲醇提取分离法可简便快捷地获得血浆及脏器中的鞘氨醇1-磷酸,结合液-质联用仪可对血浆、组织脏器中的鞘氨醇1-磷酸进行定量检测具有高效、重现性好等优点,特别适用于大量生物样本的快速处理与分析。

英文摘要:

Aim To establish a simplified extraction method from biological sample, and quantify sphingosine 1- phosphate (SIP) at the level of nanogram. Methods The methanol precipitation combing with ultrasonic extraction method was used to extract and separate S1 P, then the supernatant was analyzed by liquid chromatography mass spectrome- try (LC-MS) under the selective ion monitoring mode. Results The extraction method was effective and time saving, the limitation of quantification of S1P was 159. 7 pg; The S1P content in human plasma was 128. 8 + 33.3μg/L, and the SIP content in plasma, heart, liver, lung, kidney and brain of the C57 BL/6 mouse was 181.8 ± 21.1 μg/L, 37. 6± 2. 8 ng/g, 54.9±4. 9 ng,/g, 230. 1±60. 5 ng./g, 21.5 ±6. 7 ng/g and 102. 2± 23.8 ng/g, respectively. Conelusion Methanol precipitation combing with ultrasonic extraction could effectively separate S1P from plasma and organ, and the extract could be quantified by LC-MS directly. This method is effective with good reproducibility, and is suitable for quick quantitative analysis of a great deal of biological sample.

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期刊信息
  • 《中国动脉硬化杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国病理生理学会
  • 主编:姜志胜
  • 地址:湖南省衡阳市南华大学内
  • 邮编:421001
  • 邮箱:dmzzbjb@163.net
  • 电话:0734-8160765
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-3949
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1262/R
  • 邮发代号:42-165
  • 获奖情况:
  • 中国科学技术论文统计源期刊,中国科学引文数据库来源期刊,中国学术期刊综合评价数据库来源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:17016