目的建立制备型高效液相色谱(PHPLC)法分离纯化红花Carthamus tinctorius L.中羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B。方法红花水提液用大孔吸附树脂初步纯化后,PHPLC法制备。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(9.4 mm×250 mm,5μm);柱温25℃;流动相乙腈-0.02%三氟乙酸,梯度洗脱;体积流量4.2 m L/min;检测波长403 nm,收集相应流份,经真空冷冻干燥得单体。结果羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B的转移率分别为70.08%和70.33%,纯度均大于98%。结论该方法操作简单,高效快速,产物纯度高,适合实验室小规模制备。