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人ERK2基因对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响
  • ISSN号:1009-0002
  • 期刊名称:《生物技术通讯》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]锦州医科大学附属第一医院,辽宁锦州121000, [2]解放军总医院,北京100853, [3]军事医学科学院生物工程研究所,北京100850
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金(81672602,81472589,81502264);北京市科技新星计划(Z141102001814055);军事医学科学院创新基金转化医学项目(ZHYX003)
中文摘要:

目的:构建携带Myc标签的人细胞外信号调节激酶2(ERK2)的真核表达载体,表达Myc-ERK2融合蛋白,检测其对人视网膜母细胞瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从乳腺文库中扩增人ERK2基因序列,将其插入pXJ-40载体;将重组质粒与空载体转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞系后,Western印迹检测表达情况,并进行生长曲线实验。结果:双酶切和测序鉴定表明Myc-ERK2真核表达质粒构建成功;转染WERI-Rb-1细胞后融合蛋白获得表达,生长曲线实验结果表明ERK2可促进肿瘤细胞的生长。结论:携带Myc标签的人ERK2基因的真核表达载体能在人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞中表达,且能促进该细胞的生长。本实验为进一步研究ERK2在肿瘤尤其是眼恶性肿瘤中的功能奠定了基础。

英文摘要:

Objective:To construct the eukaryotic expression vector of human extracellular signal regulated kinase2(ERK2)labeled with Myc and detect its expression and activity in human retinoblastoma cells.Methods:Human ERK2coding region was amplified from human mammary cDNA library by PCR and cloned into pXJ-40vector.The recombinant plasmid Myc-ERK2was transfected into human WERI-Rb-1cells and the expressionwas detected by Western blot.The proliferation of WERI-Rb-1cells was examined by growth curve experiment.Results:Myc-ERK2eukaryotic expression vector was constructed and verified by double enzyme digestion and nucleic acid sequencing.Human ERK2protein was expressed in human WERI-Rb-1cells as was shown by Western blot results and ERK2protein promoted the proliferation of WERI-Rb-1cells.Conclusion:The Myc-ERK2was identified to promote WERI-Rb-1cell proliferation,which is a fundamental study for ERK2's role in retinob-laastoma.

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期刊信息
  • 《生物技术通讯》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:军事医学科学院
  • 主办单位:军事医学科学院生物工程研究所
  • 主编:陈薇
  • 地址:北京丰台东大街20号
  • 邮编:100071
  • 邮箱:swtx@263.net
  • 电话:010-66948856
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-0002
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4226/Q
  • 邮发代号:82-196
  • 获奖情况:
  • 全军医学期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:8812