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Robust and regulatory expression of defensin A gene driven by vitellogenin promoter in transgenic Anopheles stephensi
  • ISSN号:1000-7423
  • 期刊名称:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:TQ453[化学工程—农药化工]
  • 作者机构:[1]Institute of Tropical Diseases, School of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
  • 相关基金:Supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant No. 30271162) and the Chinese Scholarship Council (Grant No. 2003365035).Part of the experiment was done in Prof. Anthony A. James' laboratory, Department of Molecular Biology and Biochemistry, University, of California, lrvine, USA. The authors thank Prof. James and other colleagues for invaluable discussion and technical support.
中文摘要:

遗传上修改的蚊子的使用减少或代替地人口是新策略控制忍受蚊子的疾病。这策略的实现的前提是操作蚊子的染色体并且导致一个合适的倡导者驾驶的受动器分子的特定的表示的能力。这研究的目的是在转基因的疟蚊属 stephensi 在 avitellogenin 倡导者的控制下面计算疟蚊属 sinensis 的 defensin 三氯化氮的表达式。疟蚊属 gambiaevitellogenin 的规章的区域被克隆,潜水艇克隆进与编码顺序的 defensin A 由一个表示盒子组成的转移向量 pSLFa。然后,表示盒子被变成转变向量 pBac [3xP3-DsRedafm ] 用 Asc l 消化。recombinant 原生质标志 DNA ofpBac [3xP3DsRed-AgVgT2-DefA ] 并且助手原生质标志 DNA ofphsp-pSac 是进胚胎的微注射一。Stephensi。积极转基因的蚊子被在官方补给的幼虫的心中观察特定的红荧光屏蔽。南部的污点分析显示出那单个拷贝的 transgeneintegrated 进染色体一。Stephens ! 。RT-PCR 分析证明 defensin A 基因在血饭以后在女蚊子的胖身体明确地表示了。有趣地, mRNAof defensin A 与 endogenousvitellogenin 基因的相比是更稳定的。在多重血饭以后, defensin A 的表示作为一种可约的骑车 andnon 类型出现了,为它的反病原体效果的一个关键特征。从上面的数据,我们断定 Vg 倡导者的规章的函数和 defensin 的表达式基因相对在疟蚊蚊子的不同种类被保存。这些分子能在遗传上修改的蚊子的发展被用作候选人。

英文摘要:

The use of genetically modified mosquitoes to reduce or replace field populations is a new strategy to control mosquito-borne diseases. The precondition of the implementation of this strategy is the ability to manipulate the genome of mosquitoes and to induce specific expression of the effector molecules driven by a suitable promoter. The objective of this study is to evaluate the expression of defensin A gene of Anopheles sinensis under the control of a vitellogenin promoter in transgenic Anopheles stephensi. The regulatory region of Anopheles gambiae vitellogenin was cloned and subcloned into transfer vector pSLFa consisting of an expression cassette with defensin A coding sequence. Then, the expression cassette was transferred into transformation vector pBac[3xP3-DsRedafm] using Asc I digestion. The recombinant plasmid DNA of pBac[3xP3DsRed-AgVgT2-DefA] and helper plasmid DNA of phsp-pBac were micro-injected into embryos of An. stephensi. The positive transgenic mosquitoes were screened by observing specific red fluorescence in the eyes of G1 larvae. Southern blot analysis showed that a single-copy transgene integrated into the genome of An. stephensi. RT-PCR analysis showed that the defensin A gene expressed specifically in fat bodies of female mosquitoes after a blood meal. Interestingly, the mRNA of defensin A is more stable compared with that of the endogenous vitellogenin gene. After multiple blood meals, the expression of defensin A appeared as a reducible and non-cycling type, a crucial feature for its anti-pathogen effect. From data above, we concluded that the regulatory function of the Vg promoter and the expression of defensin A gene were relatively conserved in different species of anopheles mosquitoes. These molecules could be used as candidates in the development of genetically modified mosquitoes.

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期刊信息
  • 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 主编:汤林华
  • 地址:上海市瑞金二路207号右楼3F
  • 邮编:200025
  • 邮箱:zgjsczz@vip.163.net
  • 电话:021-54562376
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7423
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1248/R
  • 邮发代号:4-362
  • 获奖情况:
  • 1997年被中华预防医学会评为先进编辑部,2000年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,2001年荣获中华预防医学会2001年优秀期刊二等奖,2003年荣获2001-2002年中华预防医学会系列杂志优...,2009年获“百种中国杰出学术期刊”奖,2010年荣获上海市科技期刊审计优秀奖,2011年遴选为第二届“中国精品科技期刊”,获第三届“RCCSE中国权威学术期刊”,2013年荣获国家卫生计生委首届优秀期刊,2013年荣获第四届华东地区优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11792