位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
Fas基因mRNA反义靶点筛选和体外验证
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:《中国生物工程杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q756[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850, [2]军事医学科学院附属307医院,北京100850
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30271546)
中文摘要:

应用PARASS(poly-AanchoredRNAaccessiblesitesscreening)技术筛选Fas基因mRNA获得3个潜在反义作用靶点,靶点1、2、3分别位于Fas基因297nt~317nt、619nt~639nt和662nt~682nt。设计了对应靶点的反义寡核苷酸A1、A2、A3和10-23型DNAzymeD1、D2和D3。将反义寡核苷酸和Fas基因RNA结合再加入RNaseH进行反应,10-23型DNAzyme则直接与Fas基因RNA作用,结果表明:3个靶点的反义寡核苷酸组及DNAzyme均能降解Fas基因RNA,为有效靶点,其靶点反应优势次序为靶点3〉靶点l〉靶点2。而非靶点对照组和有效靶点突变了2个碱基的对照组均没有反应。靶点2和靶点3与ISIS公司经过多次实验筛选到的Fas反义作用靶点位置基本相同,表明PARASS技术的有效性和可靠性。获得的有效反义寡核苷酸和DNAzyme为后续研究打下基础。

英文摘要:

Three candidate antisense target sites of mouse Fas gene were screened by PARASS (poly-A anchored RNA accessible sites screening) technology. They were target at Fas gene 297nt~317nt, 618nt~ 638nt and 662nt~682nt. Antisense oligos ( A1, A2 and A3 ) and DNAzymes ( D1, D2, and D3 ) for every target site were designed and synthesized. In vitro, the validation of the sites were judged by antisense oligos included RNase H splicing and the DNAzyme degradation. The results indicated that A1, A2 and A3 introduced RNase H degradation. DNAzymes D1, D2 and D3 cleaved Fas mRNA effectively. Neither degradation observed in antisense oligo RNase H group in non-target site ( 1211~1231nt) and 2 bases mismatched of A3, nor splicing occurred in DNzyme group in non-target site (1211~1231nt) and 2 bases mismatched of D3. Site 2 and 3 were at the same positions with those of ISIS Pharmaceuticals. The effective antisense oligos and DNAzymes for Fas gene could be used for the research subsequently.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959