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AK078438基因功能的初步研究
  • ISSN号:1000-7083
  • 期刊名称:《四川动物》
  • 时间:0
  • 分类:Q819[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064, [2]四川大学生物治疗国家重点实验室,成都610064
  • 相关基金:国家863计划(2004CB518800&2001CB510001)
中文摘要:

目的初步研究AK078438基因的功能。方法用已制备的AK078438抗体为一抗,对小鼠心、肝、脾、肺、肾组织进行免疫组织化学(Immunochistochemistry)检测各组织中该基因的表达情况。检测到肾脏组织中表达该基因之后,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription—polymerase chain reaction,RT—PCR)技术,从小鼠肾脏中提取总RNA,并以之为模板,扩增出AK078438基因。构建绿色荧光表达载体,转染内皮细胞,MTT以及Hoechst荧光染色检测该基因对细胞凋亡的影响。结果免疫组织化学结果显示在小鼠的肾脏组织中检测到该基因表达。RT—PCR得到全长为1065bp的AK078438基因,并成功构建了P—EGFP-AK078438质粒,MTT以及Hochest33258荧光染色检测结果表明该基因的过表达有促进内皮细胞凋亡的作用。结论AK基因在肾脏组织中呈阳性表达,并有促进内皮细胞凋亡的作用,为进一步深入研究该基因功能提供了实验基础。

英文摘要:

Objective To study the function of AK078438. Methods Prepared AK078438 polyclonal antibodies, which were suitable to detect endogenous AK078438 in mice, were used as a first antibody in immunohistochemistry. The AK078438 gene was amplified from total RNA extracted from mice kidneys. A eukaryotic expression vector, pEGFP-N1- AK078438, was constructed and then transfeeted into endotheliocyte cells. The induction of apoptosis was measured by MTT and Hoechst 33258 staining. Results Immunohistochemistry revealed that AK078438 was only expressed in kidneys. A 1065 bp fragment was obtained by RT-PCR. The recombinant plasmid pEGFP-mAK078438 was confirmed correctly. The overexpression of recombinant plasmid pEGFP-mAK078438, which was evaluated by MTT and observed by Hoeehst staining, resulted in apoptosis in endotheliocyte. Conclusion AK078438 expresses in the kidney and induces apoptosis in endothelioeyte, which provides a foundation for further research.

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期刊信息
  • 《四川动物》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:四川省科学技术协会
  • 主办单位:四川省动物学会 四川省野生动物保护协会
  • 主编:岳碧松
  • 地址:成都市望江路29号四川大学生命科学学院内
  • 邮编:610064
  • 邮箱:scdwzz001@163.com
  • 电话:028-85410485
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7083
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1193/Q
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 四川省首届优秀期刊评比获二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8319