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聚乙烯亚胺-黄芪多糖共聚物的制备及其基因传递性能观察
  • ISSN号:1671-6825
  • 期刊名称:《郑州大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q782[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1] 河南省人民医院药学部,郑州450003, [2] 郑州大学药学院,郑州450001
  • 相关基金:国家自然科学基金81273451;国家级大学生创新创业训练计划项目201310459047
中文摘要:

目的:制备聚乙烯亚胺( PEI)-黄芪多糖( RAP)共聚物,探讨其作为非病毒基因载体的可行性。方法:采用氮丙啶法、高碘酸钾-PEI法以及羰基二咪唑-PEI法制备PEI-RAP。利用红外光谱鉴定3种方法所得产物的结构表征。通过琼脂糖凝胶电泳以及粒径和Zeta电位的测定考察PEI-RAP与质粒DNA的相互作用。 MTT法考察PEI-RAP载体的细胞毒性。 PEI-RAP负载绿色荧光表达载体pEGFP转染MCF-7、Hela和SMMC-7721细胞株观察转染效能。结果:通过氮丙啶法成功地将PEI接枝在RAP上,但是另外2种方法未得到目标产物。琼脂糖凝胶电泳结果表明PEI-RAP可以通过静电作用负载质粒 DNA。当PEI-RAP与pEGFP 质量比为12砄1时,复合物粒径为156.61 nm,电位为+26.89 mV。 PEI-RAP载体无细胞毒性。体外转染实验表明,PEI-RAP可将pEGFP高效转染至MCF-7、Hela、SMMC-7721细胞。结论:成功制备了PEI-RAP共聚物,该共聚物是一种具有潜在应用前景的新的非病毒基因载体。

英文摘要:

To prepare polyethylenimine-radix astragali polysaccharide (PEI-RAP) copolymer and investigate the efficiency of PEI-RAP to transfect tumor cells in vitro .Met hods: PEI-RAP copolymers were prepared with three different methods, polymerization of aziridine, KIO4-PEI reactions and CDI-PEI reactions.The products were characterized using FT-IR.The interaction of PEI-RAP with DNA was investigated using particle size analysis , Zeta-potential measurements and gel electrophoresis assay .MTT method was used to detect the cytotoxicity of PEI-RAP.PEI-RAP was used to deliver pEGFP in three tumor cells, MCF-7, Hela and SMMC-7721 cell lines.Results:PEI-RAP was prepared by polymerization of aziridine successfully , while the other two methods were failed .Agarose gel retardation assay suggested that PEI-RAP could bind and condense plasmid DNA efficiently .When the mass ratio of PEI-RAP to the pEGFP was 12:1,the size and the Zeta potential of the complexes were 156.61 nm and +26.89 mV.The vector PEI-RAP showed no cytotoxicity .The reporter protein assay showed that pEGFP delivered by PEI-RAP could express green fluorescent protein efficiently in three tumor cells in vitro . Conclusion:The prepared PEI-RAP copolymer could be a promising non-viral gene delivery vector.

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期刊信息
  • 《郑州大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:河南省教育厅
  • 主办单位:郑州大学
  • 主编:辛世俊
  • 地址:郑州市高新区科学大道100号
  • 邮编:450001
  • 邮箱:xzshi@126.com
  • 电话:0371-67781728
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-6825
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1340/R
  • 邮发代号:36-111
  • 获奖情况:
  • 综合性医药卫生类核心期刊,教育部优秀科技期刊一等奖,中国优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15607