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日本血吸虫mago nashi基因的克隆表达及其功能研究
  • ISSN号:1671-4652
  • 期刊名称:《扬州大学学报:农业与生命科学版》
  • 时间:0
  • 分类:R532.21[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30671581); 国家重点基础研究计划项目(973-2007CB513108); 国家高技术研究发展计划项目(863-2006AA10A207)
中文摘要:

以日本血吸虫18 d虫体的cDNA为模板,PCR获得Sjmago nashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441 bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668;应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况。结果表明:该基因在不同发育阶段均有表达,在13日龄童虫表达量相对最高,32日龄次之;在不同性别成虫虫体中,该基因在雄虫的表达量远高于雌虫,说明该基因为日本血吸虫性别发育差异基因。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌中表达,表达产物分子质量为19.5 ku,并以Ni-NTA HisBind Resin纯化重组蛋白。Western blotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得25.94%的减虫率和30.01%的肝脏减卵率。

英文摘要:

PCR technique was applied to amplify a full-length cDNA encoding protein S.japonicum mago nashi(Sj mago nashi) from schistosomula cDNA.The cDNA containing the ORF of Sj magonashi was cloned with the length of 441 bp,which was encoding 146 amino acids.The expression profiles of Sj mago nashi were determined by qPCR-using-the template cDNAs isolated from 7,13,18,23,32,42,42 d female and male parasites.qPCR analysis revealed that the gene was similarily expressed in each development stage,but 10 times higher expressed in-42 d-male adult worm than-42 d-female adult worm,suggesting this gene as male differently expressed.The cDNA containing the Open Reading Frame of mago nashi was then subcloned into a pET28a(+) vector and the recombinant plasmid was transformed into competent E.coil/BL21 for producing recombinant protein.The recombinant protein was purified,and showed a good antigenicity detected by Western blotting.Animal experiment indicated that the vaccination of recombinant Sj mago nashi protein in mice led to 25.94% worm and 30.01% liver egg burden reduction respectively,when compared with those of the blank control.

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期刊信息
  • 《扬州大学学报:农业与生命科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:扬州大学
  • 主编:焦新安
  • 地址:江苏省扬州市大学南路88号
  • 邮编:225009
  • 邮箱:
  • 电话:0514-87991323
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-4652
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1648/S
  • 邮发代号:28-9
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
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