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利用双向电泳技术分析正常大鼠肾小球蛋白质组方法的建立
  • ISSN号:1009-587X
  • 期刊名称:《中国中西医结合肾病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R563.1[医药卫生—呼吸系统;医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]解放军总医院肾病科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京100853, [2]中国科学院生物物理研究所,北京100101
  • 相关基金:国家自然科学基金重点资助项目(No.30630033)
中文摘要:

目的:利用双向电泳技术分析大鼠肾小球蛋白质,以建立肾小球蛋白质组分析的方法。方法:选取体重约200g的雄性Wistar大鼠,分离肾小球并提取蛋白质。使用24cm、pH3-11的IPG胶条对蛋白质进行一相等电聚焦,采用12.5%聚丙烯酰胺凝胶进行二相分离。Decyder软件分析凝胶上的蛋白质点,切取1个蛋白质点,经过胰蛋白酶消化后,使用飞行质谱获取肽指纹谱,并用Mascot软件分析。结果:纯化的肾小球纯度在90%以上,在双向电泳的凝胶上,共发现1240个肾小球蛋白质;切取的蛋白质点经鉴定为CAPZA2蛋白质,Mascot得分为137分(阈值为61分)。结论:成功建立了双向电泳分析大鼠肾小球蛋白质组的方法。

英文摘要:

Objective:To establish the method of analyzing the proteomics of rat glomeruli by Two-dimensional gel electrophoresis (2-DE).Methods:The glomeruli protein isolated from 200 g wistar rat was separated by 24 cm pH 3-11 IPG strip and 12.5% polyacrylamide gel.The number of protein spot was calculated by Decyder software.The protein spot was digested by tripsin and the peptide mapping fingerprint was obtained by Maldi-tof.The results were analyzed by Mascot software.Results:The purity of glomeruli was more than 90%.There were 1 240 spots being found in 2-DE map.The protein spot was identified as capping protein muscle Z-line alpha 2 (CAPZA2) protein with the value of 137 calculated by mascot (threshold was 61).Conclusion:The method of analyzing the rat glomeruli by 2-DE map is established successfully.

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期刊信息
  • 《中国中西医结合肾病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国中西医结合学会
  • 主编:
  • 地址:山西太原解放路162号(太原市06079信箱)
  • 邮编:030006
  • 邮箱:sx7965258@126.com;yhkj@public.ty.sx.cn
  • 电话:0351-7965258
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-587X
  • 国内统一刊号:ISSN:14-1277/R
  • 邮发代号:22-26
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊
  • 被引量:21630