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猪附红细胞体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
  • ISSN号:1673-4696
  • 期刊名称:《中国兽医科学》
  • 时间:0
  • 分类:S852.62[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133002
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30860203); 公益性行业(农业)科研专项(200903036-13)
中文摘要:

为建立一种能定性与定量检测猪附红细胞体的方法,根据GenBank中猪附红细胞体的16SrRNA基因高度保守区设计了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了一种快速检测猪附红细胞体核酸载量的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法在107~101 copies/μL具有良好的线性关系(RSq=0.999)。能检测到模板的下限为30copies,灵敏度是普通PCR检测方法的100倍。该检测方法与其他猪常见病病原体无交叉反应,具有良好的重复性。对临诊疑似猪附红细胞体感染猪血液进行了检测,其检出率比常规PCR方法高10%。表明该方法可用于临床上猪附红细胞体的检测及定量分析。

英文摘要:

To establish a qualitative and quantitative method to detect Mycoplasma suis ,a pair of pri- mers and a probe were designed based on the high conserved region of M. suis 16 S rRNA gene retrieved from GenBank. A series of PCR and fluorescent quantitative PCR were carried out to optimize the reaction conditions and establish standard curves. The results showed that the method had a good linear relativity from 107 copies/μL to 101 copies/μL(RSq=0. 999),and had a sensitivity of detecting 30 copies of hi. suis DNA,which was 100 times more sensitive than conventional PCR,and it was highly specific, good reproducibility and no cross reactivity. In clinical practice, a detection rate was 10% higher than conventional PCR. It could be applied for clinical diagnosis and quantification analysis of M. suis.

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编:殷宏
  • 地址:兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编:730046
  • 邮箱:zgsykx@zgsykx.com
  • 电话:0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4696
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6141