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人骨形态发生蛋白6(hBMP6)在毕赤酵母中的分泌表达
  • ISSN号:0465-7942
  • 期刊名称:《南开大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南开大学医学院分子遗传实验室,天津300071
  • 相关基金:国家自然科学基金(30700471); 国家自然科学基金(30640029)
中文摘要:

以重组质粒pcDNA6A-BMP6为模板PCR扩增hBMP6成熟肽cDNA编码序列,将该序列克隆到酵母分泌表达表达载体pPIC9K中.重组质粒pPIC9K-hBMP6经SacI酶切线性化,电击转化毕赤酵母GS115,PCR法筛选阳性转化子,利用梯度浓度G418筛选到七株高拷贝整合的阳性转化子。用甲醇进行诱导表达,SDSPAGE及Western-blot检测结果表明hBMP6成熟肽以分子量约为34和18 kD两种不同糖基化修饰的单体形式存在,具有良好的免疫原性.

英文摘要:

A coding sequence of mature human BMP6 was amplified by PCR and cloned into plasmid pPIC9K.Recombinant plasmid was linearized by SacI,then transformed into Pichia pastoris.The transformant was screened by PCR,and induced expression by methanol,seven strains haboring multi-copy of codon-optimized hBMP6 expression cassette were screened.The results of SDS- PAGE and Western-blot indicate that 34 and 18 kD proteins were produced in supernatant as monomers which have character of immunogenity.

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期刊信息
  • 《南开大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南开大学
  • 主编:田建国
  • 地址:天津南开区卫津路94号
  • 邮编:300071
  • 邮箱:
  • 电话:022-23501681
  • 国际标准刊号:ISSN:0465-7942
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1105/N
  • 邮发代号:6-174
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),德国数学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4822