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分子信标用于p53 mRNA的体外定量检测
  • ISSN号:0567-7351
  • 期刊名称:《化学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q2[生物学—细胞生物学] S852.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]湖南大学化学化工学院,化学生物传感与计量学国家重点实验室,长沙410082, [2]湖南大学生物医学工程中心,长沙410082, [3]湖南省生物纳米工程技术研究中心,长沙410082
  • 相关基金:国家重点基础研究发展规划(No.2002CB513110)、科技部国际合作重点项目(No.2003DF000039)、国家科技攻关计划项目(No.2003BA310A16)、国家自然科学基金(No.20305006)资助项目.致谢感谢中南大学湘雅医学院肖志强博士提供CNE2-vector和CNE2-p53 RNAi细胞.
中文摘要:

根据p53基因的序列设计并合成了能特异性检测p53 mRNA的分子信标(MB),发展了一种快速定量测定细胞内总RNA提取物中p53 mRNA的方法.采用鼻咽癌(CNE2)细胞系和经RNA干扰技术降低p53基因表达的CNE2-p53RNAi细胞系,抽提总RNA并用MB检测,验证了MB的检测对象是p53 mRNA.将该方法应用于多种肿瘤细胞内p53基因表达水平的分析,表达变化趋势与经典的mRNA分析方法RT-PCR检测结果相符.在此基础上,用MB对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理的肺腺癌细胞(A549)进行了p53 mRNA的体外定量检测,结果表明采用MB能够快速地获知该药物对细胞内p53 mRNA表达影响的信息.

英文摘要:

A p53 molecular beacon (p53 MB) designed according to the p53 gene sequence was synthesized to quantitatively detect p53 mRNA in vitro. The specificity of the p53 MB was tested by hybridizing the MB with total RNA extracted from CNE2, CNE2-vector (CNE2 cells transfected with empty plasmid) and CNE2-p53 RNA interference (CNE2 cells transfected with p53 RNA interference plasmid) cell lines. Lower fluorescence intensity in CNE2-p53 RNA interference cell samples confirmed the specificity of the p53 MB to the p53 mRNA. The change of the p53 mRNA expression in various kinds of cell lines was measured by traditional RT- Polymerase Chain Reaction (PCR). Based on this, the p53 mRNA expression in the lung carcinoma cells of A549 treated with 5-fluorouracil at various time was detected by p53 MB in vitro. These results indicated the rapid response of p53 MB to the effect of the drug on the expression of p53 mRNA in cells.

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期刊信息
  • 《化学学报》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院上海有机化学研究所
  • 主编:周其林
  • 地址:上海市零陵路345号
  • 邮编:200032
  • 邮箱:hxxb@sioc.ac.cn
  • 电话:021-54925085
  • 国际标准刊号:ISSN:0567-7351
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1320/O6
  • 邮发代号:4-209
  • 获奖情况:
  • 首届国家期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双高期刊”
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:28694