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阿尔兹海默病相关基因nicastrin启动子的克隆和鉴定
  • ISSN号:1672-7347
  • 期刊名称:《中南大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中南大学医学遗传学国家重点实验室,长沙410008
  • 相关基金:国家“973”计划(2004CB518601);国家自然科学基金(30300101,30400226)
中文摘要:

目的:克隆和鉴定与阿尔兹海默病发生有关的γ-分泌酶的组成蛋白之一nicastrin(NCT)基因的启动子。用于开展其转录调控机制的研究。方法:用PCR方法从人基因组DNA中分离NCT基因编码区上游大小约为1.8kb的片段并以此为基础对启动子进行两端删除分析,分别扩增大小不等的片段,与pGL3-Enhancer荧光素酶报告基因载体质量组,通过瞬时转染Hela细胞,细胞裂解液进行双荧光素酶活性分析,分离NCT基因的启动子区。结果:NCT基因启动子的420bp片段在Hela细胞中具有最强的启动活性,另237bp片段为有活性的最小片段。结论:NCT启动子很可能位于翻译起始位点上游-432/-133处,其基础启动子位于-359/-90。

英文摘要:

Objective To identify the promoter of human nicastrin (NCT) gene, a major component of γ-secretase which is closely related with pathogenesis of Alzheimer' s disease. Methods Promoter of human Alzheimer' s disease related gene, nicastrin, a 1 768 bp fragment was firstly isolated from human genomic DNA by PCR. This fragment' s 3 flanking end was 4 bp upstream to the start codon ATG ( + 1 ) of the gene. This fragment was used as template, a series of deleted fragments were amplified and constructed to the pGL3 :Enhancer plasmid with the artificial designed linkers. The relative activity of their promoter in Hela cells was studied by dual-luciferase assay. Results The 420 bp fragment showed the strongest activity, and the 237 bp fragment was the minimal fragment in length with activity. Conclusion The promoter of NCT is located at - 432/-133 region upstream the translational start codon, while its basal promoter is between -359/-90 that drives the transcription of reporter gene in Hela cells.

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期刊信息
  • 《中南大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学
  • 主编:李桂源
  • 地址:湖南省长沙市湘雅路110号 中南大学湘雅医学院75号信箱
  • 邮编:410078
  • 邮箱:xyxb2005@vip.163.com xyxb2005@126.com
  • 电话:0731-84805495 84805496
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-7347
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1427/R
  • 邮发代号:42-10
  • 获奖情况:
  • 省优秀科技期刊一等奖,全国优秀科技期刊三等奖,1992、1996年,中国生物医学核心期刊,中国期刊方阵双效期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11694