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转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因
  • ISSN号:1006-687X
  • 期刊名称:《应用与环境生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q933[生物学—微生物学] Q943.2[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所,农业部食品质量安全监控重点开放实验室,江苏省食品质量安全重点实验室,南京210014, [2]南京农业大学生命科学学院,农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京210095
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30400013)资助
中文摘要:

用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克隆与测序,根据测序结果(共4551个碱基)设计引物,从CDS-1的基因组中扩增到同样大小的片段,把该片断克隆到广宿主载体pPZP201上,得到重组质粒pCDZ1,通过三亲接合的方法把pCDZ1导入CDS-M1中进行功能互补实验,结果显示CDS-M1的呋喃丹水解功能得到了恢复,表明该片断中包含呋喃丹水解酶相关基因.图7表1参14

英文摘要:

Carbofuran degrading mutant CDS-M1 was obtained by mutating Sphingomonas agrestis CDS-1 with transposon Tn5 carried on the suicide plasmid pSC123. Genomic DNA library was constructed in E. coli DHSct using pMD18-T as vector. By using transposon rescue, a 4 551 bp DNA sequence of S. agrestis CDS-1 flanking the Tn5 insertion site was obtained. A pair of PCR primers were synthesized according to the sequence adjacent to transposon. With these primers, a same size PCR product was amplified from the genomic DNA of CDS-1. The PCR product was ligated into broad host vector pPZP201 to construct recombined plasmid CDZI. CDZ1 was then transferred into mutant CDS-M1 by triparental mating, The result showed that the transformant with CDZI had regained carbofuran degrading ability. The study indicated that the 4 551 bp DNA sequence was a gene fragment relative to carbofuran hydrolyzing. Fig 7, Tab l, Ref 14

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期刊信息
  • 《应用与环境生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院成都生物研究所
  • 主编:吴宁
  • 地址:成都市人民南路4段9号
  • 邮编:610041
  • 邮箱:biojaeb@cib.ac.cn
  • 电话:028-82890917
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-687X
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1482/Q
  • 邮发代号:62-15
  • 获奖情况:
  • 中国农业期刊金犁奖学术类一等奖(2006),* 中国期刊方阵双效期刊(2002年),* 四川省第二届优秀期刊(2000年),* 四川省一级学术期刊(1998年)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:23016