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大肠杆菌qseC基因敲除及其缺陷株运动能力研究
  • ISSN号:2095-610X
  • 期刊名称:《昆明医科大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q784[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]昆明医科大学第一附属医院心血管外科, [2]昆明医科大学第一附属医院麻醉科,云南昆明650032, [3]昆明医科大学第三附属医院胸心外科,云南昆明650118
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81460278);云南省应用基础研究基金资助项目(2014FB024)
中文摘要:

目的 通过Red同源重组法构建qseC基因缺失的大肠杆菌突变株,探讨qseC基因对大肠杆菌运动能力的影响.方法 PCR扩增两翼与目的基因上下游同源、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化入大肠杆菌MC1000,在Red同源重组酶作用下,用含同源臂的氯霉素抗性片段置换目的 基因qseC,并利用FLP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除.测定qseC基因缺失株运动能力的变化.结果 qseC基因已被成功敲除.在LB培养基中,qseC基因缺陷株的生长状况与亲株无明显差异.MC1000与MC1000qseC基因缺失株运动圆环的直径分别为(6.10±0.36)mm和(3.20±0.53)mm(P〈0.01).结论 成功构建大肠杆菌qseC基因缺失突变株,且qseC基因对细菌运动能力具有重要调控作用.

英文摘要:

Objective To construct a qseC-deleted mutant strain of Escherlchla coll by using Red recombination and to study the motility of qseC gene in the mutants. Methods The chlorarnphenicol-resistant gene flanked by homologues of target genes was amplified by PCR and electro-transformed into E. coli MC1000. When induced by L-arabinose, the plasmid pKD46 could express three recombinant proteins of k -prophage, which led to the replacement of target gene (qseC) with chloramphenicol-resistant gene. Then the chloramphenicol-resistant gene was eliminated by FLP-promoted recombination events. The motility of wild-type and mutant strain was detected. Results The qseC-deleted mutant of E. coli was confirmed by various PCR. Gene qseC was completely deleted. There was no significant difference in growth ability between the qseC mutant strain and the wild-type strain MC1000. The sizes of motility halos was (6.10 ± 0.36) mm and (3.20± 0.53) mm, respectively. Conclusion The qseC-deleted mutant of E. coli was constructed successfully, and the qseC gene plays an important role in regulation of motility in Eseherichia coli.

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期刊信息
  • 《昆明医科大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:云南省教育厅
  • 主办单位:昆明医科大学
  • 主编:李松
  • 地址:昆明市呈贡新城雨花街道春融西路1168号
  • 邮编:650500
  • 邮箱:
  • 电话:0871-65936489 65393133
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-610X
  • 国内统一刊号:ISSN:53-1221/R
  • 邮发代号:64-82
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊,1992年获全国首届优秀科技期刊评比三等奖,1995年获全国高校自然科学学报系统优秀学报一等奖,1997年获全国第二届优秀科技期刊评比二等奖,1998年获高校自然科学学报优秀学报二等奖,1990年获全国期刊展印制质量三等奖,2010年获中国科技论文在线优秀期刊二等奖,2010年获教育部中国科技论文在线优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:4948