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MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响
  • ISSN号:1671-8259
  • 期刊名称:《西安交通大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R34[医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系,陕西西安710061, [2]西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,陕西西安710061, [3]西安交通大学医学院心血管研究中心,陕西西安710061
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.81171398);陕西省科技攻关项目重大科技专项(No.2010ZDKG-50)
中文摘要:

目的 构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响.方法 以pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变.结果 测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖.结论 成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖.

英文摘要:

Objective To construct an overexpression vector of microR-338-3p (miR-338-3p) and detect its effect on the proliferation of human gastric cancer cell line SGC-7901.Methods pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR eukaryotic expression vector was cut using restriction site of Hind Ⅲ and EcoR Ⅰ,connected to miR-338-3p oligonucleotide,and identified by sequencing and blast.miR-338-3p overexpression vector was transfected into SGC-7901 cells and the expression level was determined by real-time PCR.The proliferation of SGC-7901 cells was also examined by MTT.Results The overexpression vector of miR-338-3p was identified as real by sequencing.The expression level of miR-338-3p in SGC-7901 cells with expression vectors transfected was increased significantly (P<0.05).The proliferation of SGC-7901 cells in vitro was also inhibited.Conclusion The overexpression vector of miR-338-3p was successfully constructed and human gastric cancer cell SGC-7901 instantaneously expressing miR-338-3p was obtained,which preliminarily confirmed that the overexpression of miR-338-3p can inhibit the proliferation of cancer cells.

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期刊信息
  • 《西安交通大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西安交通大学
  • 主编:闫剑群
  • 地址:西安市雁塔西路76号
  • 邮编:710061
  • 邮箱:yxxuebao@mail.xjtu.edu.cn
  • 电话:029-82655412
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8259
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1399/R
  • 邮发代号:52-39
  • 获奖情况:
  • 中国学术期刊综合评价数据库来源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰医学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:10536