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CD63基因TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价
  • ISSN号:1673-4696
  • 期刊名称:《中国兽医科学》
  • 时间:0
  • 分类:R979.5[医药卫生—药品;医药卫生—药学]
  • 作者机构:[1]西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030, [2]甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州730030, [3]西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31460665); 中央高校基本科研业务费专项资金项目(zyp2015005); 中央专项研究生科研创新项目(Yxm2015211)
中文摘要:

为建立一种CD63基因TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,以期为CD63基因的动态检测提供有效的实验手段,根据GenBank中公布的CD63基因序列,设计1对荧光定量PCR引物及1条探针,建立一种快速检测CD63基因的实时荧光定量PCR方法,并对建立的方法进行条件优化。结果显示,建立的实时荧光定量PCR方法线性关系较好,以质粒标准品构建的标准曲线相关系数r2为0.997;灵敏性及重复性均较高;应用建立的方法对多种种属来源细胞进行检测,能检出不同类型细胞中CD63的含量。结果表明,成功建立了一种快速、准确检测CD63基因的TaqMan实时荧光定量PCR方法。

英文摘要:

To develope a real-time TaqMan reverse transcription-PCR(RT-PCR) assay for effective quantification of CD63 gene, based on the CD63 gene sequence retrieved from Gen Bank, a pair of PCR primers and a probe were designed. Then a real-time Taq Man RT-PCR assay for accurate quantification of CD63 gene was developed and optimized. In result, the real-time Taq Man RT-PCR assay had a good linear relationship. The standard curve correlation coefficient r2 was 0.997. It also had a high sensitivity and reproducibility.We successfully detected and quantified CD63 gene in cells from different species. In conclusion, a rapid and accurate method for quantification of CD63 gene by real-time Taq Man reverse transcription-PCR was successfully developed.

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编:殷宏
  • 地址:兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编:730046
  • 邮箱:zgsykx@zgsykx.com
  • 电话:0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4696
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6141