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膜连蛋白 A2基因实时荧光定量 PCR 检测方法的建立及应用
  • ISSN号:1007-5038
  • 期刊名称:《动物医学进展》
  • 时间:0
  • 分类:S854.43[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州730030, [2]西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030, [3]西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31460665);教育部“长江学者和创新团队发展计划”项目(IRT13091);中央高校基本科研业务费专项资金项目(31920150025)
中文摘要:

为建立膜连蛋白 A2(AnxA2)基因 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法,根据 Gen-Bank 中公布的 AnxA2基因序列设计并合成引物,经过条件优化,建立了 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法。该方法线性关系较好,以质粒标准品构建的标准曲线相关系数 R2为0.999;灵敏性好,比普通 PCR 灵敏100倍。应用建立的方法对随机选取的几种哺乳动物细胞进行检测。结果表明,建立的方法能成功检出不同细胞中 AnxA2含量。表明本研究建立的 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR 检测方法灵敏性高,重复性好,可用于 AnxA2的检测及定量分析。

英文摘要:

In order to establish AnxA2 SYBR Green I real-time PCR,one pair of primers were designed and synthesized based on the published gene sequence of AnxA2 in GenBank.After optimizing the reaction con-ditions,AnxA2 SYBR Green I real-time PCR was established with good linear relationship,and the stand-ard calibration curve correlation coefficient R2 was 0 .999 for standard plasmid.It also had good sensitivity, about 100 times more sensitive than conventional PCR.We also detected several randomly selected mam-malian cells with this method.The results showed that the method could successfully detect the content of AnxA2 in different cells.It proved that the established AnxA2 SYBR Green I real-time PCR was of high sensitivity,good reproducibility and could be used in the detection of AnxA2 and quantitative analysis.

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期刊信息
  • 《动物医学进展》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西北农林科技大学
  • 主编:张彦明
  • 地址:西北农林科技大学畜牧兽医学院
  • 邮编:712100
  • 邮箱:dyjzyilan@263.net
  • 电话:029-87092574
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-5038
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1306/S
  • 邮发代号:52-60
  • 获奖情况:
  • 陕西省优秀科技期刊奖,全国畜牧兽医优秀期刊奖,《CAJ-CD规范》执行优秀奖,畜牧兽医类核心期刊,中国农业核心期刊,陕西省优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:19330