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PRRSV感染性克隆5’非翻译区序列缺失突变分析
  • ISSN号:1005-4545
  • 期刊名称:《中国兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室,上海200232, [2]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
  • 相关基金:国家自然科学基金重点项目(30530580);科技部重大基础研究“973”专项(2005CB523202)
中文摘要:

在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上,通过突变PCR获得了病毒基因组5’UTR系列缺失的全长突变体克隆:pCBCM1、pCBCM3、pCBCM5、pCBCM7、pCBCM9、pCBCM45、pCBCM69、pCBCM100,随后将上述突变体体外转录成RNA之后转染MARC-145细胞,进行病毒感染性、复制和转录分析,以鉴定特定的缺失区的调控功能。结果显示,病毒5’UTR起始的第1个碱基是保持病毒感染性非必需的核苷酸;前45个碱基对病毒基因组的复制是非必需的。Northern—Blot结果显示pCBCM1亚基因组mRNA可以进行高效率的转录,而其余突变体的亚基因组转录受到严重抑制。由此证明,PRRSV5’UTR的完整性对病毒意义重大,碱基的少量以及大部分缺失会对病毒产生极大的影响。

英文摘要:

The genomic 5' untranslated region (UTR) of single-stranded,positive-sense RNA viruses is thought to play a very important role in viral genomic replication,subgenomic mRNA transcription and protein translation. In this study,based on the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infectious full length eDNA elone pCBC2,a series of eDNA clones with 5' UTR truncated were obtained through PCR-based mutagenesis. Then the RNAs via in vitro transcription were respectively transfected into MARC-145 cells for further cytopathie effect (CPE) observation,genomic and subgenomic mRN A analysis,to investigate the regulatory function of 5' UTR. Results showed that the first base pair of PRRSV 5' UTR should be dispensable for the virus infection; the 45bp in 5' end of 5' UTR was dispensable for genomic RNA replication but those mutants truncated in this region couldn't cause CPE. The results mentioned above indicated that the integrity of 5' UTR should be crucial for the replication and transcription of PRRSV.

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期刊信息
  • 《中国兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学
  • 主编:王哲
  • 地址:吉林省长春市西安大路5333号
  • 邮编:130062
  • 邮箱:xbcjvs@163.com
  • 电话:0431-87836531 87836534
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-4545
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1234/R
  • 邮发代号:12-105
  • 获奖情况:
  • 第二届全国优秀科技期刊评比二等奖,连续多次被评为全军优秀医学期刊一等奖,全国高校优秀自然科学学报评比一等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18973