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糖基转移酶基因双敲除对依博素生物合成的影响
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:中国生物工程杂志
  • 时间:0
  • 页码:46-51
  • 语言:中文
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室,北京100050, [2]军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850
  • 相关基金:国家自然科学基金重点资助项目(30530830)
  • 相关项目:抗类风湿性关节炎微生物胞外多糖的组合生物学及其衍生物研究
中文摘要:

以往研究已确定链霉菌胞外多糖依博素的生物合成基因簇(ste),ste15和ste22分别编码葡萄糖糖基转移酶和鼠李糖糖基转移酶。现通过基因同源重组双交换,在ste15基因缺失突变株Streptomyces sp.139(ste15^-)基础上,再进行ste22基因阻断,经Southern杂交验证,得到了ste15和ste22双基因缺失突变株Streptomyces sp.139(ste15^-ste22^-),并对该菌株进行了基因互补研究。双基因缺失株产生的胞外多糖与依博素相比,葡萄糖与鼠李糖含量明显降低,分子量下降,生物活性明显变弱。基因互补株产生的胞外多糖中葡萄糖与鼠李糖含量基本恢复至依博素水平,生物活性也显著提高。因此,进一步阐明了ste15和ste22基因参与了依博素生物合成中葡萄糖和鼠李糖重复单元序列的形成过程,在依博素的生物合成中起重要作用,变株产生的依博素新衍生物体内外生物学活性正在深入研究中。

英文摘要:

The biosynthesis cluster (ste) of a novel exololysaccharide called Ebosin producing by Streptomyces had been identified previously, that ste15 and ste22 encode glucosyhransferase and rhamnosyltransferase respectively. The ste22 gene was disrupted with a double crossover via homologous recombination in the mutant strain Streptomyces sp. 139 (ste15^-). The mutant strain Streptomyces sp. 139 (ste15^- ste22^-) was identified by Southern blot and gene complementation also performed. Compared with Ebosin, the glucose and rhamnose of EPS15-22m produced by Streptomyces sp. 139 (ste15^ ste22^-) were reduced obviously and the Mp and the antagonist activity for IL-1 R decreased. Glucose, rhamnose and the antagonist activity for IL-1R were recovered in EPS15-22c producing by the gene complemented strain. It elucidated that genes ste15 and ste22 play essential roles in the formation of repeating units of sugars during Ebosin biosynthesis. The activities of Ebosin new derivatives produced by the mutants need to be studied further both in vitro and in vivo.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959