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Cdyl基因敲除的小鼠诱导多能干细胞系的建立及鉴定
  • ISSN号:1672-3554
  • 期刊名称:《中山大学学报:医学科学版》
  • 时间:0
  • 分类:R329.21[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中山大学干细胞与组织工程中心,广东广州510080, [2]中山大学附属第二医院儿科,广东广州510120
  • 相关基金:广东省自然科学基金博士启动(9451008901002230); 国家自然科学基金(81000150)
中文摘要:

【目的】建立Cdyl基因敲除的小鼠诱导多能干细胞系(iPSC)。【方法】通过组织块贴壁法培养Cdyl-/-的胚胎成纤维细胞(MEF)。将pMx-Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4和hrGFP五种质粒分别转染Plat-E细胞,收集病毒上清,感染Cdyl-/-MEF获得Cdyl-/-iPSC,并对Cdyl-/-iPS细胞的分子标记及体内外分化能力进行检测。【结果】取Cdyl-/-胎鼠皮肤,培养得到增殖旺盛的Cdyl-/-MEF。成功包装逆转录病毒并感染Cdyl-/-MEF,得到胚胎干细胞样的Cdyl-/-iPS细胞。该细胞表达AKP、Oct3/4、SSEA-1,在体内外可以分化为三胚层的细胞类型。【结论】Cdyl-/-iPS细胞具有自我更新和多向分化能力的特性。Cdyl-/-iPS细胞系的建立为研究Cdyl在小鼠早期胚胎发育中的功能提供一个良好的细胞模型。

英文摘要:

[Objective]This study was designed to establish induced pluripotent stem cell line from Cdyl knockout mice.[Methods] Cdyl-/-MEF were attained by adhesion culture of E18.5 embryonic tissue.pMx-Oct3/4,Sox2,c-Myc,Klf4,and hrGFP plasmid were transfected into Plat-E cells,respectively.Then virus-containing supernatants were harvested to infect Cdyl-/-MEF.The characteristics of Cdyl-/-iPSC were analyzed by detection of pluripotent marker expression and differentiation capacity in vivo and in vitro.[Results] The Cdyl-/-iPS cell colonies were emerged 5 days after Cdyl-/-MEF were infected with virus-containing supernatants.Cdyl-/-iPSC expressed AKP,Oct3/4,SSEA-1 and were able to differentiate into cell types of three germ layers.[Conclusion] Cdyl-/-iPS cell line was successfully established and provides a valuable model for studying Cdyl function in mouse embryonic development.

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期刊信息
  • 《中山大学学报:医学科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:中山大学
  • 主编:关永源
  • 地址:广州市中山二路74号
  • 邮编:510080
  • 邮箱:xbmed@mail.sysu.edu.cn
  • 电话:020-87331643
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-3554
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1575/R
  • 邮发代号:46-141
  • 获奖情况:
  • 百种国家重点期刊,中国精品科技期刊,中国高校精...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
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