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野生型DNA聚合酶β转染Eca-109细胞后增变基因表型变化
  • ISSN号:1671-6825
  • 期刊名称:《郑州大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R730[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室,郑州450001, [2]郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心,郑州450052, [3]郑州大学公共卫生学院营养卫生学教研室,郑州450001, [4]郑州大学基础医学院病理生理学教研室,郑州450001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目39870287;河南省科技攻关基金资助项目
中文摘要:

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转染对照组(C1)和未转染对照组(C2)。应用原位杂交技术显示wt-polbeta和wt-p53的杂交信号,免疫细胞化学染色显示POLB-免疫反应性(IR)和多药耐受(MDR1)-IR,免疫印迹显示wt-polbeta和突变(mt)-polbeta的带型,细胞化学技术检测各组细胞的增殖与分化细胞的比率。结果:polbeta免疫印迹结果显示E组呈现增强的wt-polbeta主带,C1、C2组呈现很弱wt-polbeta主带和显著突变的(mt)-polbeta主带(P〈0.01);polbeta免疫细胞化学结果显示E组的强信号定位于细胞核内,C1、C2组信号皆很弱(P〈0.01)。E组的wt-polbeta及wt-p53原位杂交的信号强于C1、C2组(P〈0.01)。E组MDR1的免疫反应性和增殖与分化细胞的比率低于C1、C2组(P〈0.01)。结论:wt-polbeta转染的Eca-109细胞呈现wt-polbeta及wt-p53表达上调而mt-polbeta及MDR1表达下调的增变基因表型减弱。

英文摘要:

Aim: To explore the effects on polbeta-overexpressed human esophageal cancer Eca-109 cells transfected with wild type(wt)-polbeta.Methods:The identified recombinant pcDNA 3.1 was transfected into the Eca-109 cells,and the cultured cells were divided into 3 groups: transfected experimental group(E),empty plasmid control group(C1),and untransfected control group(C2).The expressions of polbeta,p53,MDR1,and the ratio of proliferating/differentiated cells were detected by in situ hybridization,immunocytochemistry,immunoblotting,and cytochemisrtry techniques,respectively.Results: The immuoblotting showed that there was an enhanced band of wt-polbeta in E group,while a distinct major band of mt-polbeta in C1/C2 group(P〈0.01).In polbeta immunocytochemistry the signals located in the nuclei were much stronger in E group than those in C1/C2 group(P〈0.01).In situ hybridization the signals of wt-polbeta and wt-p53 located in the cytoplasm were markedly stronger in E group than those in C1/C2 group(P〈0.01);whereas,the MDR1-immunoreactivity(IR) and the ratio of proliferating cells versus differentiated cells were much decreased in E group than those in C1/C2 group(P〈0.01).Conclusion: In the transfected Eca-109 cells the expressions of wt-polbeta and wt-p53 are up-regulated and those of the mt-polbeta and MDR1 are down-regulated,which exhibites reduction of the mutator phenotype.

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期刊信息
  • 《郑州大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:河南省教育厅
  • 主办单位:郑州大学
  • 主编:辛世俊
  • 地址:郑州市高新区科学大道100号
  • 邮编:450001
  • 邮箱:xzshi@126.com
  • 电话:0371-67781728
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-6825
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1340/R
  • 邮发代号:36-111
  • 获奖情况:
  • 综合性医药卫生类核心期刊,教育部优秀科技期刊一等奖,中国优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15607