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构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统
  • ISSN号:1673-8225
  • 期刊名称:中国组织工程研究
  • 时间:2015
  • 页码:788-793
  • 分类:R318[医药卫生—生物医学工程;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]山西医科大学,基础医学院生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市 030001, [2]山西医科大学,细胞生理学省部共建教育部重点实验室,山西省太原市 030001, [3]山西医科大学附属山西省人民医院普外科,山西省太原市030012
  • 相关基金:国家自然科学基金(30901821,81172136);2011年山西省高等学校优秀青年学术带头人项目
  • 相关项目:乳糜微粒定向介导TK基因载体系统对肝癌杀伤作用
中文摘要:

背景:自杀基因系统无选择性,不仅能杀伤癌细胞,对正常细胞也有同样作用,所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。 目的:评价载脂蛋白E修饰脂质体(apoE-lipoplexes)介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。 方法:apoE-lipoplexes包裹pAFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞,筛选HSVtk稳定表达细胞克隆(Li-7-tk),荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,Western blotting检测HSVtk基因表达,MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。 结果与结论:自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆(Li-7-tk),HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于 Li-7细胞后,细胞凋亡明显增加(P〈0.01)。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中,自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。

英文摘要:

BACKGROUND:Suicide gene system without selectivity not only kil s cancer cel s, but also has the same effect on normal cel s, so the construction of targeting vector of gene therapy has become an urgent problem to be solved. OBJECTIVE:To evaluate kil ing effects of apolipoprotein E modified liposomes (apoE-lipoplexes) mediated TK/ganciclovir suicide gene transfection on hepatocel ular carcinoma Li-7 cel s. METHODS:The apoE-lipoplexes packed pAFP-TK-IRES2-EGFP eukaryotic expression plasmids were transfected into Li-7 cel s. HSVtk stably expressing cel clone (Li-7-tk) was screened. Fluorescence microscopy was used to observe the expression of enhanced green fluorescent protein. HSVtk gene expression was detected using western blotting. MTT method was used to evaluate the kil ing effects of HSVtk/GCV system on Li-7 cel s. RESULTS AND CONCLUSION:Stable clone (Li-7-tk) was obtained through screening suicide gene transfected Li-7 cel s. After HSVtk/ganciclovir system acting on Li-7 cel s, cel apoptosis rate was significantly increased (P〈0.01). In alpha fetoprotein-positive hepatocel ular carcinoma cel line Li-7, suicide gene vector expresses stably and effectively kil s cancer cel s.

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