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一种新的人胚胎干细胞自身来源的滋养层支持其体外培养
  • ISSN号:0253-9772
  • 期刊名称:《遗传》
  • 时间:0
  • 分类:Q343[生物学—遗传学] Q954.46[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]中南大学医学遗传学国家重点实验室,长沙410078
  • 相关基金:国家重点基础研究发展规划(973项目)项目(编号:2004cB518601)和国家自然科学基金重点项目(编号:30730052)资助 [Supported by the National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2004CB518601) and the National Natural Science Foundation of China (No. 30730052)]
中文摘要:

通过人胚胎干细胞(Human embryonic stem cells,hESCs)经体内分化获取间充质干细胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)为人胚胎干细胞提供-种新的滋养层。将约5×10^6个hESCs注射入重症免疫联合缺陷小鼠形成畸胎瘤,8周后再从畸胎瘤中分离MSCs并鉴定,将MSCs作为hESCs的滋养层细胞,并检测和观察hESCs的生长情况、细胞特性和分化能力。从畸胎瘤中获得了纯度较高的具有类似骨髓来源的MSC特性的细胞群,其形态相似、表面抗原标志相似(CD34和CD45阴性,CD29、CD49b、CD105、CD73和CD90阳性),经诱导可以向成骨细胞和成脂细胞分化。将hESCs在MSCs滋养层细胞上传代培养10代以上,hESCs依然具有正常的细胞形态,反转录PCR证实其特异转录因子Oct4、Nanog的表达,干细胞表面标记SSEA-1显示为阴性,SSEA-4、TRA.1—60、TRA-1-81显示为阳性,碱性磷酸酶染色显示为阳性,并且核型正常。体外EB形成和体内畸胎瘤形成证明了其全能性。因此来源于hESCs本身的MSCs可以被用来作为支持胚胎干细胞生长并维持其未分化状态的滋养层细胞。

英文摘要:

This study was carried out to determine whether mesenchymal stem cells (MSCs) derived from teratoma of hu- man embryonic stem cells (hESCs) function as feeder cells to support hESCs growth. Approximately 5×10^6 hESCs were injected into the hind limb muscle of each SCID-beige mouse to form teratoma. After 8 weeks, the MSCs were isolated from the teratoma and cultured in Mesencult medium. Purified MSCs were then used as the feeder cells for hESCs culture. High purity MSCs derived from teratoma were isolated. The cells were morphologically similar to bone marrow MSCs (bMSCs). The teratoma-derived MSCs were negative for CD34 and CD45 but positive for CD29, CD49b, CD105, CD73, and CD90, which resembled those expressed by bMSCs. After passaged on MSCs feeder cells more than 10 passages, hESCs maintained hESC characteristics in morphology. Reverse PCR showed the expression of Oct4 and Nanog. SSEA-1 was negative and SSEA-4, TRA-1-60, and TRA-1-81 were positive. Alkaline phosphatase staining showed positive re- suits.The karyotype remained normal. Moreover, the hECSs cultured on teratoma-derived MSCs formed teratoma in vivo and embryoid body in vitro confirmed their pluripotency. Accordingly, MSCs derived from hESCs by in vivo differentiation can be used as the feeder cells for hESCs culture.

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期刊信息
  • 《遗传》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国遗传学会
  • 主编:张永清
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院中国科学院遗传发育所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:yczz@genetics.ac.cn
  • 电话:010-64807669
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-9772
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1913/R
  • 邮发代号:2-810
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,《CAJ-CD》执行优秀奖,2008年12月获“中国精品科技期刊”证书和北京市印...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:23270