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结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达
  • ISSN号:1007-9572
  • 期刊名称:《中国全科医学》
  • 时间:0
  • 分类:R378.911[医药卫生—病原生物学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中国人民解放军总医院第二附属医院结核病研究室,北京市100091
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30471648)
中文摘要:

目的 通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37 Rv19-kDa DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建19-kDa重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);在异丙基硫代-13-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白。结果重组质粒pET24b-19-kDa测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以可溶性形式表达。不同IPTG诱导时间实验表明重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白诱导3~4h重组蛋白在大肠杆菌中的表达量最高。结论 pET24b-19-kDa大肠杆菌工程株可高表达结核分枝杆菌重组19-kDa蛋白。

英文摘要:

Objective To obtain recombinant 19 - kDa protein from Mycobacterium tuberculosis by using gene engi- neering technology. Methods The gene coding 19 - kDa protein inserted into a expression vector pET24b, and then transferred E. coli BL21 ( DE3 ). The expressed product was identified by SDS - PAGE, Plasmid pET24b containingl9 - kDa gene was transferred into competent Escherichia coli BL21 ( DE3 ) and 19 - kDa gene was over expressed by the inducement of IPTG. Resuits The recombinant 19 - kDa protein was expressed in soluble form in E. coli. When the culture was induced for 3 - 4 hours, the recombinant 19 - KDa protein was produced in highest quantity . Conclusion Escherichia coli containing recombinant plasmid pET24b - 19 - kDa gene could express recombinant 19 - KDa protein in high level.

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期刊信息
  • 《中国全科医学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国医院协会 中国全科医学杂志社
  • 主编:韩建军
  • 地址:北京市西城区广义街5号广益大厦A座907
  • 邮编:100053
  • 邮箱:zgqkyx@chinagp.net.cn
  • 电话:010-63052088 83525550
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-9572
  • 国内统一刊号:ISSN:13-1222/R
  • 邮发代号:80-258
  • 获奖情况:
  • 获2000-2001年度河北省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:91748