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结核分枝杆菌重组蛋白诊断应用价值的研究
  • 项目名称:结核分枝杆菌重组蛋白诊断应用价值的研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30471648
  • 申请代码:H2002
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:吴雪琼
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:中国人民解放军总医院
  • 批准年度:2004
中文摘要:

结核分枝杆菌5种主要分泌蛋白(Mtb8.4、Mtb48、14-kDa 、19-kDa、Mtb39)的克隆、表达、纯化;了解Mtb11蛋白对致敏豚鼠的DTH反应;通过ELISA方法检测Mtb11和ESAT6蛋白刺激外周血淋巴细胞产生γ干扰素的量,建立一种新的特异诊断结核菌感染的检测手段;用同一批结核病人血清和卡介苗接种前后健康对照者血清,通过ELISA方法评价上述5种新制备的重组蛋白抗原和已有的10种重组蛋白抗原(38-kDa蛋白、ESAT6、MPT64、Ag85A、Ag85B、katG 、MPT63 、16-kDa蛋白、Mtb11 和Mtb81)检测抗结核抗体的灵敏度和特异性;选择灵敏度、特异性强的蛋白研制结核病皮肤诊断和血清学诊断试剂。

结论摘要:

克隆、表达和纯化了16种结核分枝杆菌重组蛋白并制备了一种糖抗原;初步评价了6种结核分枝杆菌重组蛋白抗原诱发不同分枝杆菌致敏豚鼠的特异性,并评价了2种结核分枝杆菌特异重组蛋白抗原作为皮肤诊断试剂的敏感性和特异性;筛选出2种抗原初步研制结核特异的皮肤诊断试剂,目前正在进一步评价中;评价了12种结核分枝杆菌抗原检测血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性,筛选出4种抗原初步研制结核抗体蛋白诊断芯片,目前正在评价中;初步建立了通过ELISA检测CFP10和ESAT6蛋白刺激外周血淋巴细胞产生γ干扰素水平的方法;建立了通过ELISPOT技术检测外周血分泌γ干扰素的淋巴细胞的方法;筛选出2种抗原初步研制结核特异的皮肤诊断试剂,目前正在进一步评价中;克隆、表达、纯化了结核分枝杆菌Rv1009重组蛋白,发现它具有促进分枝杆菌生长的作用,初步研制了结核分枝杆菌生长促进剂。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 10
  • 4
  • 0
  • 0
  • 0
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