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应用RACE法克隆鸽恒定链基因的研究
  • ISSN号:0253-9772
  • 期刊名称:遗传
  • 时间:0
  • 页码:77-80
  • 语言:中文
  • 分类:Q81[生物学—生物工程] S85[农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236041, [2]安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥231072
  • 相关基金:国家自然基金项目(30671537);安徽省教育厅教学研究项目(2007jyxm345);阜阳师范学院自然科学青年项目(2003YQL08).
  • 相关项目:恒定链的点突变对融合基因的表达、定位及其免疫应答的影响
中文摘要:

使用辛酸沉藏-凝胶过滤法提取猪血清中免疫球蛋白IgM,并通过其纯度鉴定等探讨提纯效果。通过辛酸沉淀法粗提免疫球蛋白,再结合Sephadex G200凝胶过滤法纯化获得IgM,利用SDS—PAGE电泳法和AlphaEaseFC凝胶成像分析软件测定其分予量和纯度、Bradford法测定提取蛋白浓度并计算其得率.结果显示辛酸粗提能够去除大部分杂蛋白,凝胶过滤获得两个洗脱峰,其中第一峰通过电泳鉴定含有IgM,纯度63.8%,得率1.28mg/ml血清.利用辛酸沉淀-凝胶过滤法能够获取纯度和得率都较高的IgM,纯度可满足普通要求的实验和应用。

英文摘要:

Purify the immunoglobulin M (IgM) from swine serum with the caprylic acid precipitation-the Sepixerdax G200 gelatin filters and approach the purifying effect by identifying its purity. The experiment combines the eaprylic acid precipitation method and the Sepherdax G200 gelatin filters to purify IgM. Then the molecular weight and purity of IgM are de termined by SDS-PAGE and AlphaEaseFC analysis software, and the yield of IgM is calculated according to the protein concentration determined by Bradford kit. The caprylie acid precipitation can eliminate the bulk of proteins which are not IgM. Two eluting peaks are abtained in the process of purification IgM by the Sepherdax G200 gelatin filters. The purity of IgM which is only in the first eluting peak is 63.8%; and the yield is 1.28 mg/ml serum. The experiment can get high pnrirv. and yield of IgM by the caprylic acid precipitation method and the Sepherdax G200 gelatin filters. The IgM purified horn swine serum in this experiment can meet the need of the experiments and the applications,in which the requirement or purity is, net high.

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期刊信息
  • 《遗传》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国遗传学会
  • 主编:张永清
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院中国科学院遗传发育所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:yczz@genetics.ac.cn
  • 电话:010-64807669
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-9772
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1913/R
  • 邮发代号:2-810
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,《CAJ-CD》执行优秀奖,2008年12月获“中国精品科技期刊”证书和北京市印...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:23270