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兔抗MyosinⅩ多克隆抗体的制备及初步应用
  • ISSN号:1000-1832
  • 期刊名称:《东北师大学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:R392.1[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]东北师范大学生命科学学院,吉林长春130024
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30871302;301170142); 吉林省自然科学基金资助项目(200805130)
中文摘要:

为制备兔抗肌球蛋白Ⅹ(myosinⅩ,MyoⅩ)多克隆抗体,合成了含有MyoⅩN端1 000~1 021个氨基酸的多肽,将纯化后的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpethemocyanin,KLH)进行交联;通过背部皮下免疫新西兰大白兔获得免疫血清,并通过ELISA、免疫印迹、免疫荧光等分析对免疫血清进行了初步的验证.结果表明:经过4次免疫后可获得免疫血清,ELISA检测表明抗体终效价达到1∶51 200,抗原吸附实验进一步证明了此多克隆抗体的特异性.利用获得的多克隆抗体检测了多种组织中MyoⅩ的表达,发现兔抗MyoⅩ多克隆抗体可特异性识别多种组织中的MyoⅩ.免疫荧光染色表明该抗体可以显示MyoⅩ在COS-7细胞、NLT细胞和神经元中的分布.

英文摘要:

To obtain the rabbit polyclonal antibodies against Myosin Ⅹ,a polypeptide containing of 1 000~1 021 amino acids from N-terminal of Myosin Ⅹ was synthesized and coupled to KLH.Then,the polypeptide was used to immunize New Zealand white rabbits by subcutaneous injection to prepare the antiserum.The titer of the antiserum reached to 1∶51 200 after 4 times of immune as revealed by ELISA,and the specificity of the polyclonal antibody was confirmed by antigen absorption test.Furthermore,found this polyclonal antibody can specifically recognized Myo Ⅹ in several tissues as revealed by Western blot.In addition,immunofluorescence displayed the distribution of Myosin Ⅹ in COS-7 cells,NLT cells and primarily cultured neurons.In conclusion,the Myosin Ⅹ polyclonal antibody was successfully prepared,which provided a powerful tool for further study of expression and distribution of Myosin Ⅹ in tissues and cells.

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期刊信息
  • 《东北师大学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:东北师范大学
  • 主编:刘宝
  • 地址:长春市净月大街2555号
  • 邮编:130117
  • 邮箱:dslkxb@nenu.edu.cn
  • 电话:0431-89165992
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-1832
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1123/N
  • 邮发代号:12-43
  • 获奖情况:
  • 中文综合性科学技术类核心期刊,中国科学引文数据库来源期刊,中国科技论文统计源期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:7830