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约氏疟原虫红外期发育相关基因的研究
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:《第三军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R382.31[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学] R394.3[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学基础医学部病原生物学教研室,重庆400038, [2]安徽理工大学医学院病原生物学教研室,淮南232001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30371261,30271163)
中文摘要:

目的寻找约氏疟原虫红外期发育相关基因,进行序列分析并推测其功能。方法分别提取约氏疟原虫感染大鼠(IL)和正常大鼠(UL)肝脏总RNA,根据疟原虫基因A+T含量高(〉70%)的特点,设计可选择性扩增约氏疟原虫基因的G+C含量为40%的引物,采用差异显示PCR(differential display RT-PCR,DD-PCR)技术进行扩增,筛选差异片段,经TA克隆后测序并进行序列分析。结果找到6个与约氏疟原虫红外期发育相关基因(PyHs4、PyHs5、PyHs6、PyHs7、PyHs8、PyHs9);其中PyHs4与约氏疟原虫乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶(phosphoacetylglucosamine mutase,AGM)具有相似性,PyHs5与约氏疟原虫红细胞膜蛋白3(erythrocyte membrance protein,PyHs5)具有同源性,PyHs6、PyHs7、PyHs8、PyHs9为功能未知基因。结论应用DD-PCR技术成功扩增了与约氏疟原虫红外期发育相关基因,为进一步的重组表达进行功能和疫苗研究奠定基础。

英文摘要:

Objective To find the development-related genes of Plasrnodium yoelii by sequence analysis and predict their functions during exoerythrocytic stage. Methods Total RNA was extracted from the liver of normal rat and Plasrnodium yoelii infected rat followed by DD-PCR with the primer containing 40% G + C. The primer designed and synthesized accommodated the high adenine and thymidine rich genome of Plasmodium yoelii. The special bands of the PCR products were purified and cloned into plasmid T-vector. The recombinant plasmids were sequenced and analyzed. Results Six new genes (PyHs4, PyHsS, PyHs6, PyHs7, PyHs8, PyHs9) were related to the development of Plctsmodium yoelii during exo-erythrocytic stage. In these genes, PyHs4 and PyHs5 had homology with phosphoacetyl glucosamine mutase (AGM) and erythrocyte membrance protein (EMP3) respectively. PyHs6, PyHs7, PyHs8, PyHs9 were all hypothetical genes with unknown function. Conclusion The developmental genes of Plasrnodium yoelii have been amplified successfully by DD-PCR technique during exo-erythrocytic stage, which lays the foundation for the recombinant expression and new vaccine design.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
  • 地址:重庆市沙坪坝区高滩岩30号第三军医大学学报编辑部
  • 邮编:400038
  • 邮箱:aammt@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023- 68752187
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1126/R
  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:47530