为揭示疟原虫子孢子对宿主肝细胞的侵入机制,并为免疫预防、药物治疗寻找新的靶目标和提供阻断感染防治策略。本项目采用定向标签差减杂交技术(Directional tag subtractive hybridization,DTSH)富集约氏疟原虫唾液腺子孢子和肝细胞内裂殖子的差异相关cDNA,用基因芯片技术鉴定目标基因片断。将获得的目标基因,构建pJuFo噬菌体呈现文库,分别与鼠肝细胞孵育,初步筛选出能与肝细胞结合的噬菌体,然后通过竞争抑制试验、受染肝细胞膜G蛋白、胞内游离钙检测以及子孢子攻击感染试验。最终确定子孢子入侵肝细胞相关cDNA或多肽,探讨子孢子入侵肝细胞的分子基础。为研究疟原虫子孢子侵入的信号转导机制,开发新的阻断候选疫苗和靶向治疗药物提供理论基础。
为揭示疟原虫子孢子对宿主肝细胞的侵入机制,并为免疫预防、药物治疗寻找新的靶目标和提供阻断感染防治策略。本项目采用定向标签差减杂交技术(Directional tag subtractive hybridization,DTSH)富集约氏疟原虫唾液腺子孢子和肝细胞内裂殖子的差异相关cDNA,用基因芯片技术鉴定目标基因片断。将获得的目标基因,构建pJuFo噬菌体呈现文库,分别与鼠肝细胞孵育,初步筛选出能与肝细胞结合的噬菌体,然后通过竞争抑制试验、受染肝细胞膜G蛋白、胞内游离钙检测以及子孢子攻击感染试验。最终确定子孢子入侵肝细胞相关cDNA或多肽,探讨子孢子入侵肝细胞的分子基础。为研究疟原虫子孢子侵入的信号转导机制,开发新的阻断候选疫苗和靶向治疗药物提供理论基础。