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腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV—X基因启动子的体外结合
  • ISSN号:1006-7795
  • 期刊名称:《首都医科大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R512.6[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
  • 相关基金:国家自然科学基金(30500425)、霍英东青年教师基金(1010390)资助项目
中文摘要:

目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV—X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP—rep78融合蛋白;通过SDS-电泳及免疫印迹(Western blot)鉴定蛋白表达。合成地高辛标记的X启动子3段探针;以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-X启动子的结合。结果得到纯化的MBP—rep78融合蛋白;EMSA结果显示Rep78蛋白在体外能够与HBV—X启动子DNA结合,并有剂量依赖关系。结论AAVRep78可以与HBV—X启动子结合。

英文摘要:

Objective This study is to investigate the possible effect of adeno-associated virus (AAV) Rep78 on hepatitis B virus X gene (HBV-X). Methods Rep78 protein was produced as a fusion protein with MBP using pMAL-Rep78 plasmid (with full gene of Rep78) in DH-5α. SDS-PAGE and western blot were used to confirm the expression of MBP-Rep78. Electrophoretic mobility shift assay(EMSA) was utilized to detect the binding of MBP-Rep78 protein with HBV-X promoter. Results Purified MBP-Rep78 fusion protein was obtained successfully. EMSA showed Rep78 protein could bind with HBV-X promoter strongly in a dose-dependent manner. Conclusion AAV Rep78 could bind with HBV-X promoter.

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期刊信息
  • 《首都医科大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:北京市教育委员会
  • 主办单位:首都医科大学
  • 主编:王晓民
  • 地址:北京丰台区右安门外西头条10号
  • 邮编:100069
  • 邮箱:sydxb@ccmu.edu.cn
  • 电话:010-83911346 83911348
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-7795
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3662/R
  • 邮发代号:82-56
  • 获奖情况:
  • 第三届中国高校优秀科技期刊奖,中国科技论文在线...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:14086