鸡毒支原体是危害养禽业最严重的病原菌之一,由于其独特的细胞外膜结构和分子生物学特点,导致其表面抗原的复杂性,疫苗免疫效果不好,另外抗生素耐药现象日趋严重,抗生素治疗效果不佳。因此鸡毒支原体感染一直困扰和阻碍养禽业的发展,引起国内外禽病学者的关注。本课题结合兽医临床抗药株日益增多的实际情况,从新的角度分析鸡毒支原体抗药株分子生物学特点,研究外膜结构的改变及由此引起的抗原性变异,比较抗药株与敏感株结构
抗菌药物的应用是防治鸡毒支原体感染的主要措施之一,但由于长期、大量使用抗菌药物,耐药现象非常普遍和严重,持续抗生素压力下,病原发生变异逃避宿主的免疫机制,造成疫苗保护力下降。本课题从临床分离鸡毒支原体进行耐药性调查,对临床分离和实验室药物压力下筛选的鸡毒支原体耐药株与敏感株进行超微结构的观察和比较;利用SDS-PAGE进行不同株间外膜结构蛋白的比较和分析;制备特异性MG多克隆抗血清,利用Western-blot技术研究敏感株与耐药株间外膜蛋白抗原性差异,筛选与耐药性有关的特异性抗原成分;设计引物,对目的蛋白进行克隆和原核表达,并分析其一级结构及功能。本研究表明耐药性的产生伴随MG超微结构的改变,而且高水平耐药株的超微结构变化最为突出;SDS-PAGE分析结果显示不同地区分离株株间结构蛋白存在多样性,其中约55KD的蛋白条带的出现可能与耐药性的产生有关;对约55KD的蛋白进行克隆表达,序列分析表明,该蛋白的C-末端富含Pro,在富含Pro区域有两个相同的含有52个氨基酸的重复序列,不同MG株间该蛋白的差异主要存在于C-末端两个重复序列内氨基酸的丢失。本研究结果为进一步阐明抗生素压力下耐药