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异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原的筛选与鉴定
  • 项目名称:异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原的筛选与鉴定
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30370550
  • 申请代码:H1604
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:罗锋
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:四川大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

以肿瘤血管内皮细胞为靶向的抗肿瘤血管治疗研究具有重要意义. 本研究欲将人脐静脉内皮细胞株细胞制备成异种血管内皮细胞疫苗, 免疫小鼠制备异种血管内皮细胞疫苗免疫血清; 建立H22肝癌实体瘤小鼠实验模型,分离肿瘤组织微血管内皮细胞; 以异种疫苗免疫血清作为异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原蛋白质的认别分子,采用二维凝胶电泳、质谱分析等蛋白质组学技术鉴定异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原,确定新的交叉抗原蛋白质, 克隆其基因, 用ELISA、免疫组化、Norther blot等方法检测新的交叉抗原蛋白质基因在正常组织血管和各种实体瘤组织血管中的表达与分布,合成该基因DNA疫苗及多肽疫苗,免疫动物研究其抗肿瘤血管生长效应, 深入探讨异种血管内皮细胞疫苗抗肿瘤血管内皮细胞免疫反应的分子免疫机理,这将为探索抗肿瘤血管生长新方法予以启迪,为寻找抗肿瘤血管治疗新靶点设计更为有效的肿瘤疫苗奠定基础。

结论摘要:

以肿瘤血管内皮细胞为靶向的抗肿瘤血管治疗研究具有重要意义。本研究采用异种血管内皮细胞疫苗免疫小鼠制备免疫血清;以免疫血清抗体作为异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原蛋白质的认别分子,采用蛋白质组学技术鉴定异种血管内皮细胞交叉免疫反应抗原。由于肿瘤微血管内皮细胞分离纯度和稳定性差及双向电泳的重复性差等局限性,实验进行了必要调整。利用免疫沉淀、一维电泳及质谱分析方法筛选差异抗原;应用SEREX技术 鉴定出6个功能已知基因及3个功能未知基因;用内皮细胞株Eahy926代替肿瘤微血管内皮细胞,探讨肿瘤细胞与血管内皮细胞相互关系,鉴定出28个差异蛋白质。研究结果为筛选肿瘤增殖与转移相关蛋白质分子、寻找抗肿瘤血管生成新靶点提供了思路。?????.


成果综合统计
成果类型
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