蛋白质组学研究的发展,迫切需要高效分离技术,特别是液相色谱与质谱联用分析中,除盐和酶解是样品进入质谱前必须进行的处理步骤。为此,本项目利用微加工和半透膜技术,依据电渗析和离子交换原理,设计和研制了综合电渗析和离子交换优点的微型化装置,使其具有除盐和分离富集功能,并将其用于生物样品质谱分析的样品前处理,实现了高速除盐和在线富集。同时,研究该装置作为分离技术(液相色谱和毛细管电泳)与质谱之间的接口功能,使微型电除盐装置能在线去除分离介质中的盐类添加剂,从而扩展了多种分离模式和质谱联用的应用范围。利用研制的自动化和多通道结构模型和电子电路测量控制系统,采用脉冲电流使胰蛋白酶股固定在半透膜上,实现蛋白质的在线酶解,建立了可整合到蛋白质组学分析策略的新方法,使样品处理和接口转换更高效,更合理,为推动蛋白质组学中快速、高灵敏、高通量分析方法的发展提供了一种新的思路。
英文主题词Proteomics;desalting; purification; digestion; mass spectrometry interface