RNA沉默介导的抗性是一种新的植物抗病毒育种策略,对RNA沉默发生或抑制的各种生物或非生物因素的探索,已成为植物病毒学研究领域中的热点。本项目是在长期对RNA沉默及其介导病毒抗性研究的基础上,利用已获得的RNA沉默介导抗性转基因植物,即表达不可翻译PVY-CP基因的T4代转基因烟草为材料,分析不同温度下生长的转基因烟草植株中转基因mRNA积累水平,明确RNA沉默保持或抑制的温度。结合病毒学领域中参与RNA沉默途径的植物编码物质的最新研究进展,采用Northern杂交技术,分别对RNA沉默保持和抑制的植株进行RdRP和Dicer核酸酶表达水平及沉默信号siRNA积累量分析,解析由于温度的变化导致RNA沉默抑制的因素,从分子水平上阐明温度影响RNA沉默及其介导病毒抗性的作用机理。所得结果不仅可以丰富RNA沉默的理论体系,而且还能为RNA沉默介导病毒抗性这一策略的实践应用提供新的资料。